| 查看: 1736 | 回复: 5 | ||
jianglay新虫 (初入文坛)
|
[求助]
肥大细胞类胰蛋白酶测定
|
|
参考了好几篇文献方法都是这么写的： "类胰蛋白酶活力测定采用专性底物α-苯甲酰-DL-精氨酸-P-硝基苯胺（BAPAN)。 以20g/l溶于二甲基亚砜，取 加入40μL含待测液的0.1mol/l反应缓冲液1.5ml中，反应缓冲液为Tris-HCl（pH7.4 ）。 30℃反应20min后，加入0.5ml30%（体积体积）乙酸终止反应，在405nm测光吸收值。以反应缓冲液做参比调零。相对酶活力单位采用下述公式计算：（A待测 /A标准） 。配制胰蛋白酶标准溶液，做标准曲线。" 问题是我想把细胞放置在96孔培养板中进行培养，通过加入肥大细胞脱颗粒剂C48/80来使细胞脱颗粒释放类胰蛋白酶，我的操作是，50微升细胞PBS悬液加入96孔板后，加入不同浓度的C48/80刺激物50微升（培养液溶）孵育1小时候，加入BAPAN，30分钟后加入乙酸，但是实验结果吸光值不变，感到很诧异，跪求解答~ |
回复此楼» 猜你喜欢
含氟糖皮质激素的外用抗炎利器醋酸氟轻松
已经有0人回复
-
阿莫奈韦（Amenamevir）：解旋酶-引物酶靶向分子的结构特征与合成路径全解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有85人回复
-
利瑞鲁单抗：靶向KIR的NK细胞检查点工具抗体，结构基础与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
-
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 肿瘤细胞在体外无培养夜的情况下能存活多久
已经有20人回复
- 【资料】细胞培养从入门到专家------骨灰级资料整理
已经有780人回复
- 不同类别的蛋白酶的活力测定
已经有12人回复
- TPCK胰蛋白酶 酶切精氨酸和赖氨酸条件
已经有13人回复
- 为什么用胰蛋白酶消化细胞？
已经有6人回复
- 求解蛋白酶测定过程中滴加碳酸钠后出现沉淀，附详细过程~~~
已经有3人回复
- α-酪蛋白和β-酪蛋白的区别 胰蛋白酶酶解后肽段差别大吗
已经有6人回复
- 【求助/交流】Amrsco的大豆胰蛋白酶抑制剂（100mg，进口分装）的储存液和工作液怎么配
已经有5人回复
- 【求助】蛋白酶活力测定
已经有7人回复
jianglay
新虫 (初入文坛)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 11.6
- 帖子: 43
- 在线: 33.8小时
- 虫号: 1259673
- 注册: 2011-04-09
- 性别: GG
- 专业: 细胞生物学研究中的新方法
2楼2012-06-19 10:14:48
BQ20110430
铁虫 (小有名气)
- 应助: 11 (小学生)
- 金币: 3280.6
- 帖子: 232
- 在线: 16.3小时
- 虫号: 1787700
- 注册: 2012-04-30
- 性别: MM
- 专业: 环境微生物学
这个不是很在行，不过还是祝愿有人帮你指点
3楼2012-06-19 10:23:48
4楼2013-04-29 12:35:42
5楼2013-04-29 12:36:28
6楼2013-04-29 12:37:29
