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落叶秋霜

金虫 (小有名气)

[求助] DEAE纤维素分离多糖的几个问题

1、在摸索洗脱条件时,主要考虑哪几个因素?
2、如何确定洗脱液的体积?怎样计算柱体积?
3、第一次分离纯化完,第二次上样前怎样处理柱子?
4、柱子装好后用蒸馏水2.0rpm冲洗几个小时后胶面不再下降,但是当用4.2rpm冲洗(此时洗脱剂液面与胶面相平,且下端活塞关闭)凝胶柱,突然打开下端活塞时胶面迅速下降2-3cm是否说明柱子没有装好?(注:我用的洗脱流速是0.6rpm)
5、柱子装好后用4.0rpm冲柱,柱子下端出现气泡,可能是什么原因?(上端没有,因为有事情怕柱子干掉所以中间暂时停止冲柱)
6、上样前放入脱脂棉,上样时是否会有损失等不好的影响?
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我追求,但不苛求;我向往,但不奢望
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