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Kahn

金虫 (小有名气)

[求助] MTT是否染菌

最近做黄酮MTT,大家帮我看一下这是染菌了吗?下图是黄酮作用肿瘤细胞两天之后,加MTT后4小时的照片。四周用培养液天填充(之前用pbs),每组五个复孔。
空白   样1
样2       样3
样4       样5
样6       样7
样8       样9
样10     未加药
黄酮浓度80umol/L,是和药物反应了还是染菌了?其他人做MTT时遇到过这种情况吗?

mtt
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yqbter

至尊木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
Kahn: 金币+6, ★★★很有帮助, 哦,做了好几次,都是这样,只能试试了。 2012-06-15 09:49:32
应该不是污染,是黄酮与MTT反应产生的结晶,建议你加入MTT之前,弃去培养基,PBS清洗细胞3次,重新加入新鲜的培养基,再加入MTT反应!
2楼2012-06-15 08:52:06
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Kahn

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by yqbter at 2012-06-15 08:52:06
应该不是污染,是黄酮与MTT反应产生的结晶,建议你加入MTT之前,弃去培养基,PBS清洗细胞3次,重新加入新鲜的培养基,再加入MTT反应!

我老师说让我加mtt后,少反应一会儿,是不是不行。
3楼2012-06-15 09:50:09
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suifeng91

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与,应助指数 +1
Kahn: 金币+1, ★有帮助 2012-06-15 17:53:13
如果是污染的话,颜色就不会有梯度啦,呵呵!
人生不是一场物质的盛宴,而是一次灵魂的修炼,使它在谢幕之时比开幕之初更为高尚。
4楼2012-06-15 12:33:28
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mamadexiao

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与,应助指数 +1
Kahn: 金币+1, ★有帮助 2012-06-15 17:53:27
MTT
2.5小时到4小时都可以,但是你做的得统一,就是说,加MTT后培养2.5小时的话,都是2.5小时。。。
5楼2012-06-15 14:04:38
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msbiotech

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与,应助指数 +1
Kahn: 金币+1, ★有帮助, 没办法,经费有限,而且除了MTT,别的也不会做 2012-06-15 17:54:37
MTT反应是氧化-还原反应。建议你换个细胞活力检测方法,比如荧光法或ATP方法。
6楼2012-06-15 16:18:47
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