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请问为什么用EB染出来的胶都是半块都亮了
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lishenchi
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请问为什么用EB染出来的胶都是半块都亮了
开始是用GOLDVIEW,染出来紫外下上半块都有着色,后来换EB,还是这样,凝胶成像仪没有问题,电泳条件是60V,请问这种情况可能是什么原因呢?谢谢各位
跟紫外灯管也没有关系啊,因为我把胶转了90度,还是这样的,紫外每根都是好的
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1楼
2012-06-14 19:20:01
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西瓜
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5楼
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Originally posted by
wqj1988926
at 2012-06-14 19:57:01
这个是因为楼主把EB直接加入胶里的原因,EB在电泳的时候也会与胶有相对的泳动,与DNA的电泳方向是相反的,在用凝胶呈现仪拍照的时候就会出现这种情况。
一般这种情况不会影响实验结果,所以楼主不必太过担心,但为 ...
楼上正解
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6楼
2012-06-14 22:04:16
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shoppinggirl
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2012-06-15 13:43:45
在我以前的实验室也遇到过这种情况,但不影响发文章,所以就没有纠正了。分子克隆上写的是室温清水漂洗20min,可以降低由未结合的EB所引起的背景荧光。你试下洗洗,不过也不用20分钟,一下就好。感觉也可能是加EB过多的原因;还有就是你的制胶版是否水平,从图中看可能向梳子那端倾斜,EB浓度大。
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2楼
2012-06-14 19:32:54
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lishenchi
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2楼
:
Originally posted by
shoppinggirl
at 2012-06-14 19:32:54
在我以前的实验室也遇到过这种情况,但不影响发文章,所以就没有纠正了。分子克隆上写的是室温清水漂洗20min,可以降低由未结合的EB所引起的背景荧光。你试下洗洗,不过也不用20分钟,一下就好。感觉也可能是加EB过 ...
谢谢楼上,EB是按正常的加呀,别人加这个浓度没有问题也,
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3楼
2012-06-14 19:40:13
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nemo88
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4楼
2012-06-14 19:41:59
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