24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 790  |  回复: 4
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

liouwzh

木虫 (正式写手)

[求助] 请问如何将序列重复拷贝数倍增后连接

现有一序列,约350bp左右,想使此片段重复5次后连接成1750bp长度左右的片段,连接时不要出现酶切位点等接头,有没有什么好的方法?如果用重叠PCR是否可行。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

rock5719633

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

我觉得设计一对融合酶切位点,一次一个加上去,应该可以的。’

楼主的问题最后解决了么?
5楼2012-12-12 01:47:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 5 个回答

liuhedong1817

木虫 (正式写手)

hello

【答案】应助回帖

★ ★ ★
小丹木木: 金币+3, 鼓励用作 2012-09-03 13:42:52
小丹木木: 不好意思,操作失误,是鼓励应助 2012-09-03 13:43:28
可以的啊,只是比较麻烦,重叠PCR先获得两倍DNA,其中有一倍DNA,需要电泳回收,然后获得四倍DNA,同样,其中有两倍DNA,电泳回收后,再做一次重叠pCR,就可以得到5倍的DNA了!另外,我想请教您一个问题,呵呵,我最近要做CO差光谱法分析血红蛋白,我想知道你们是怎么用一氧化碳处理细胞破碎液上清的,将一氧化碳通入液体中的时候,要做什么防护吗?谢谢你了
老婆的头像
3楼2012-08-31 15:17:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liouwzh

木虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by liuhedong1817 at 2012-08-31 15:17:59
可以的啊,只是比较麻烦,重叠PCR先获得两倍DNA,其中有一倍DNA,需要电泳回收,然后获得四倍DNA,同样,其中有两倍DNA,电泳回收后,再做一次重叠pCR,就可以得到5倍的DNA了!另外,我想请教您一个问题,呵呵,我最 ...

同样序列的重叠PCR你是否做过,我担心的是第一轮PCR的时候就不能扩增出两倍的DNA,而只有单倍的DNA,或则你有关于重叠引物设计的不同技巧。
关于CO差光谱,方法如下:
(1) 向纯化后的蛋白液中加入过量的连二亚硫酸钠(约20mg),使样品处于还原态。
(2) 将上述样品一式两份:一份通CO 3min;另一份作为对照,静置于暗室中使其充分络合。
(3) 用分光光度计对样品进扫描,获取CO差光谱。
4楼2012-09-03 09:20:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 316求调剂 +5 Pigcasso 2026-03-24 5/250 2026-03-27 12:10 by zhshch
[考研] 求调剂推荐 材料 304 +10 荷包蛋hyj 2026-03-26 10/500 2026-03-27 11:51 by 帕尔马拉特
[考研] 275求调剂 +10 Micky11223 2026-03-25 12/600 2026-03-27 09:41 by caszguilin
[考研] 324求调剂 +8 hanamiko 2026-03-26 10/500 2026-03-27 08:06 by hypershenger
[考研] 304材料求调剂 +4 钟llll 2026-03-26 4/200 2026-03-27 03:42 by wxiongid
[考研] 305求调剂 +4 哇卢卡库 2026-03-26 4/200 2026-03-26 20:58 by sanrepian
[考研] 324求调剂 +4 wysyjs25 2026-03-21 4/200 2026-03-26 20:38 by fmesaito
[考研] 0703化学求调剂 +3 丹青奶盖 2026-03-26 5/250 2026-03-26 20:11 by macy2011
[考研] 334分 一志愿武理 材料求调剂 +4 李李不服输 2026-03-26 4/200 2026-03-26 16:00 by 不吃魚的貓
[考研] 281求调剂 +6 Koxui 2026-03-24 7/350 2026-03-26 15:37 by 无际的草原
[考研] 一志愿河工大 081700 276求调剂 +4 地球绕着太阳转 2026-03-23 4/200 2026-03-26 14:27 by zzll406
[考研] 考研调剂 +6 来好运来来来 2026-03-21 7/350 2026-03-25 22:43 by 418490947
[考研] 一志愿中南大学化学学硕0703总分337求调剂 +7 niko- 2026-03-22 7/350 2026-03-25 20:14 by qingfeng258
[考研] 290分调剂求助 +3 吉祥止止陈 2026-03-25 3/150 2026-03-25 19:58 by barlinike
[考研] 材料与化工304求B区调剂 +3 邱gl 2026-03-25 3/150 2026-03-25 19:03 by Ainin_
[考研] 【2026考研调剂】制药工程 284分 求相关专业调剂名额 +4 袁奂奂 2026-03-25 8/400 2026-03-25 14:32 by lbsjt
[考研] 生物学学硕求调剂 +7 小羊睡着了? 2026-03-23 10/500 2026-03-25 02:24 by 清风拂扬。 m
[考研] 333求调剂 +3 ALULU4408 2026-03-23 3/150 2026-03-23 19:04 by macy2011
[考研] 315分,诚求调剂,材料与化工085600 +3 13756423260 2026-03-22 3/150 2026-03-22 20:11 by edmund7
[考研] 材料学硕301分求调剂 +7 Liyouyumairs 2026-03-21 7/350 2026-03-21 22:31 by peike
信息提示
请填处理意见