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Marado金虫 (正式写手)
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求大神分析实验结果-转化
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对PCR产物进行加A尾，体系如下： PCR产物：40ul 10XTaq Bufferz：5ul dATP：4ul Taq(2.5U/ul)：1ul 总体系：50ul 反应条件：72℃，1h 之后直接取加A尾的PCR产物进行连接，体系如下： 加A后PCR产物：2ul pMD 19：0.5ul Buffer（solution I）3.5ul 过夜连接：12-16h 之后用JM109感受态细胞进行转化 涂LE平板（1ml的100mg/ml 氨苄加入到1L的LB培养基） 昨天下午2点半涂完平板（100ul菌液） 37℃培养到晚上10点半，之后置于室温下（20℃）到今早，发现没长- -，请问各位大神，可能是哪个步骤出现了问题，PCR新手，望指教. |
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dajiong
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