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px220

新虫 (初入文坛)

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[求助] 有没有好的HPLC测残留TFA的方法啊?

要测多肽中残留的TFA，采用Vydac C18柱，NaH2PO4（pH=7.8)做流动相时TFA出峰时间太早，而且峰形也不好，有什么好的方法能测TFA吗？
或者有什么好的测TFA 的色谱柱？
好像有很多用离子色谱测TFA的方法，不过我们实验室只有HPLC
哪位大侠帮帮忙呗

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1楼 2012-06-10 12:59:39

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houqian387

金虫 (小有名气)

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【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
px220: 金币+5, ★★★很有帮助, 非常感谢啊 2012-06-13 20:39:57

测TFA有两大问题需要解决：
1、TFA酸性强，HPLC反相无保留
2、TFA没有共轭双键，高波长无吸收。很低的波长才有响应，响应问题这里不多说，因为您的条件可能不允许。
关于TFA的保留和峰形给你几个方法供参考：
1、选择耐酸的C18柱，比如waters Xbridge ，Phenomenex Gemini等，但要关注下色谱柱的孔径。
流动相选择0.1%磷酸水溶液，或更强的酸性条件，洗脱剂选择乙腈，梯度洗脱。主要查看TFA的保留和峰形。
2、如果条件1还没有保留，那就尝试离子对色谱法，选择四丁基溴化铵水溶液做流动相，重点调节流动相的pH（碱性或中性左右的pH值）和离子浓度。保留应该没有问题了，主要查看下峰形。
希望能帮到你。