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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 【求助】HPLC检测出现倒峰原因是什么？怎么解决？
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dl355538623

木虫 (正式写手)

[交流] 【求助】HPLC检测出现倒峰原因是什么？怎么解决？

我在做HPLC检测样品，但是怎么会出现负峰呢？
所用的流动相为乙腈：水（0.05%TFA），不知道是什么原因造成？怎么解决呢？谢谢各位大侠！
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1楼 2010-12-08 13:40:29
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jiusjiu

木虫 (正式写手)
波长是多少？保留时间多少时出现的？
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2楼2010-12-08 15:36:37
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星海慧儿

荣誉版主 (职业作家)
是一直都有还是偶尔有？用的是UV吧
原因1，气泡——解决：流动相和样品（尤其是样品）超声脱气
原因2，该负峰物质的紫外吸收比参比还要弱，即该峰原本如此。
ps：可以进空针看看，判断是否为空气（建议尽可能采用小进样量）
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3楼2010-12-08 16:07:57
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dl355538623

木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by jiusjiu at 2010-12-08 15:36:37:
波长是多少？保留时间多少时出现的？

波长是228nm，保留时间在3.5min左右，但是负峰在2到3min出现。
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4楼2010-12-24 11:04:13
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dl355538623

木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by 星海慧儿 at 2010-12-08 16:07:57:
是一直都有还是偶尔有？用的是UV吧
原因1，气泡——解决：流动相和样品（尤其是样品）超声脱气
原因2，该负峰物质的紫外吸收比参比还要弱，即该峰原本如此。
ps：可以进空针看看，判断是否为空气（建议尽可能采 ...

负峰是一直有，检测器是紫外，
流动相脱气处理了，空针还没有进，我试一下，不过我跑基线很平的呀？基线平和跑空针有什么区别的？
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5楼2010-12-24 11:06:15
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fairyding

金虫 (小有名气)
打一针空白，可以的话就让负锋在没事
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6楼2010-12-24 16:48:47
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jiusjiu

木虫 (正式写手)
死时间左右出现倒峰很正常的，只要不影响你的目标化合物检测就行了
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7楼2010-12-27 15:54:06
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