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px220

新虫 (初入文坛)

[求助] 有没有好的HPLC测残留TFA的方法啊?

要测多肽中残留的TFA,采用Vydac C18柱,NaH2PO4(pH=7.8)做流动相时TFA出峰时间太早,而且峰形也不好,有什么好的方法能测TFA吗?
或者有什么好的测TFA 的色谱柱?
好像有很多用离子色谱测TFA的方法,不过我们实验室只有HPLC
哪位大侠帮帮忙呗
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yugijiang

木虫 (著名写手)

用耐水性强的色谱柱,用有机酸柱做也可以的呀,只是这价格有点高哈
5楼2012-06-27 08:38:43
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查看全部 7 个回答

痴夷子皮

版主 (文坛精英)

老痞

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
TFA容易氧化,估计不好测,把流动相pH调高一点,9左右,选用耐碱性的色谱柱看看。
守候在风中的宁静。
2楼2012-06-11 10:46:48
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houqian387

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
px220: 金币+5, ★★★很有帮助, 非常感谢啊 2012-06-13 20:39:57
测TFA有两大问题需要解决:
1、TFA酸性强,HPLC反相无保留
2、TFA没有共轭双键,高波长无吸收。很低的波长才有响应,响应问题这里不多说,因为您的条件可能不允许。
关于TFA的保留和峰形给你几个方法供参考:
1、选择耐酸的C18柱,比如waters Xbridge ,Phenomenex Gemini等,但要关注下色谱柱的孔径。
流动相选择0.1%磷酸水溶液,或更强的酸性条件,洗脱剂选择乙腈,梯度洗脱。主要查看TFA的保留和峰形。
2、如果条件1还没有保留,那就尝试离子对色谱法,选择四丁基溴化铵水溶液做流动相,重点调节流动相的pH(碱性或中性左右的pH值)和离子浓度。保留应该没有问题了,主要查看下峰形。
希望能帮到你。
3楼2012-06-11 10:57:22
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qinghuoly

木虫 (正式写手)

可以试试cosmosil 5C18-AR-II。一般酸性物质分离较好,峰形良好,基本无拖尾。
天地为帐,日月为灯,风雷为号角,云虹为旗令,山川为阵图,草木为兵卒。运阴阳五行为谋,策古今兴替为略。
4楼2012-06-19 15:59:05
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