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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 有没有好的HPLC测残留TFA的方法啊?
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px220

新虫 (初入文坛)

[求助] 有没有好的HPLC测残留TFA的方法啊?

要测多肽中残留的TFA，采用Vydac C18柱，NaH2PO4（pH=7.8)做流动相时TFA出峰时间太早，而且峰形也不好，有什么好的方法能测TFA吗？
或者有什么好的测TFA 的色谱柱？
好像有很多用离子色谱测TFA的方法，不过我们实验室只有HPLC
哪位大侠帮帮忙呗
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1楼 2012-06-10 12:59:39
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痴夷子皮

版主 (文坛精英)

老痞

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
TFA容易氧化，估计不好测，把流动相pH调高一点，9左右，选用耐碱性的色谱柱看看。
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守候在风中的宁静。
2楼2012-06-11 10:46:48
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houqian387

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
px220: 金币+5, ★★★很有帮助, 非常感谢啊 2012-06-13 20:39:57
测TFA有两大问题需要解决：
1、TFA酸性强，HPLC反相无保留
2、TFA没有共轭双键，高波长无吸收。很低的波长才有响应，响应问题这里不多说，因为您的条件可能不允许。
关于TFA的保留和峰形给你几个方法供参考：
1、选择耐酸的C18柱，比如waters Xbridge ，Phenomenex Gemini等，但要关注下色谱柱的孔径。
流动相选择0.1%磷酸水溶液，或更强的酸性条件，洗脱剂选择乙腈，梯度洗脱。主要查看TFA的保留和峰形。
2、如果条件1还没有保留，那就尝试离子对色谱法，选择四丁基溴化铵水溶液做流动相，重点调节流动相的pH（碱性或中性左右的pH值）和离子浓度。保留应该没有问题了，主要查看下峰形。
希望能帮到你。
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3楼2012-06-11 10:57:22
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qinghuoly

木虫 (正式写手)
可以试试cosmosil 5C18-AR-II。一般酸性物质分离较好，峰形良好，基本无拖尾。
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天地为帐，日月为灯，风雷为号角，云虹为旗令，山川为阵图，草木为兵卒。运阴阳五行为谋，策古今兴替为略。
4楼2012-06-19 15:59:05
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yugijiang

木虫 (著名写手)
用耐水性强的色谱柱，用有机酸柱做也可以的呀，只是这价格有点高哈
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5楼2012-06-27 08:38:43
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lzjessie_wlf

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
soundhorizo: 金币+2, 应助指数+1 2012-07-13 00:00:59
近期看到在水相中添加 isopropanol ， 使用H2O/isopropane-ACN流动相体系，可以明显延迟氨基酸在C18柱子中的保留时间. 自己也试过这个条件，发现对氨基酸有用。不知道对TFA是否有用。
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6楼2012-07-12 05:26:27
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yukepotato

金虫 (正式写手)

美猴王
应该很难做啊，TFA往往都往流动相里面加的，现在要测个人觉得很难！
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永远不要带着问题去找你的上司！
7楼2012-07-12 10:41:19
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