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chip实验超声问题 已有2人参与
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大家好： 我所做细菌蛋白的chip实验。本实验的目的是用已获得的细菌蛋白鼠单抗，通过chip实验方法（用的是millipore的EZ-CHIP试剂盒），来筛选细菌体内可能与该蛋白有直接作用的DNA片段。 前2次做chip实验是2011年12月，实验还算顺利进行吧。超声破碎是该实验的重点，超声波把基因组打断为100-1000bp左右大小的片段。我前2次，用chip实验2%琼脂糖胶电泳超声波打断后的DNA片段，发现其DNA条带大小在100-500bp左右。 但是今天即2012-6-8重复该实验发现--超声破碎这步出现严重问题：1、用2ml EP管中有1ml的样品用小探头超声破碎，结果超声不足5个间隔就产生大量泡沫。 2、超声间隔为40s，超声5s；但是泡沫依然很多；3、在冰上超声，冰极易溶化，EP管位置可能有变化，探头碰壁；后用冰盒固定EP管，探头未碰壁，依然会产生很多泡沫。4、电泳发现，超声不完全。 所以请教大家提出宝贵意见，如何解决超声问题。谢谢回复 |
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