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晴天雅子

新虫 (小有名气)

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专业: 生物化学

[求助] 80p 割胶回收

高人指点一下啊，我的pcr产物才80bp,很短，现在割胶回收不到片段，那怎么办啊？我用的是TAKARA的回收试剂盒，50bp-10kb的。再小的试剂盒也没有啊，要怎么办啊？请高手指点一下啊。谢谢！

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白岩松—不平静，就不会幸福！

1楼2012-06-06 09:41:48

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

vir2008

木虫 (著名写手)

应助: 80 (初中生)
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专业: 摩尼教

★ ★ ★
小丹木木: 金币+3, 鼓励交流 2012-06-11 13:59:06

引用回帖:

20楼: Originally posted by 晴天雅子 at 2012-06-08 12:21:52
请问两条配对的核苷酸链怎么合成啊，我之前是合成的模板引物。请问您这样做过吗，现在很是纠结啊...

目的片段配对，只是两端设计成酶切后的缺口状。
举个例子，若希望某片段5'有BamHI，3'有EcoRI酶切后的末端，则在正义链5'端添加GATCC，在反义链3'端加一个G；同时在反义链5'端加AATTC，在正义链3'端也添加一个G。两条链混合后预变性、逐渐冷却，就得到产物了。
只不过我做的是63bp的目的片段，不知道80bp是否可行。