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auau96

新虫 (小有名气)

应助: 0 (幼儿园)
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在线: 8.3小时
虫号: 1838837
注册: 2012-05-29
性别: MM
专业: 微生物遗传育种学

[求助] 酿酒酵母基因敲除实验顺利需多少时间已有2人参与

大家好我现在在做酿酒酵母基因敲除利用左右同源臂各390bp和540bp 因为本身菌株遗传背景不清楚 MARKER基因既不是抗性基因和也不是缺陷型基因用能表达的酶基因做筛选标记不知各位前辈是否有此类实验经验来敲除目的基因
实验顺利大概需多少时间能完成

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1楼 2012-06-05 11:03:28

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

zyly605

银虫 (小有名气)

应助: 0 (幼儿园)
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注册: 2009-03-02
专业: 微生物遗传育种学

引用回帖:

8楼: Originally posted by auau96 at 2012-06-06 21:10:02
谢谢设计用的是纤维素酶透明圈筛选但是做了好几次转化结果都整合不上去标记基因进入细胞内传代几次就丢了用透明圈筛选也没有圈圈得结论是未整合上去基因没敲掉

不知是不是以为我把PCR产物做转 ...

可以对构建的重组质粒进行下测序就可以知道是否突变了，我当时是这样的。