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adili

铁虫 (初入文坛)

[求助] 实时荧光PCR

各位大侠好!
       本人想请教一下我做实时荧光PCR,空白总是CT值30左右出现,这样的结果可信不,我的阳性在CT值15的时候出现!我排除过好多次是不是污染的情况,可还是不行,我的引物浓度是10um上下游各加0.5ul.引物也试着重新设计合成,可还是这样的情况。各位大侠帮帮忙
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adili

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by zmeng at 2012-06-06 17:19:31
引物浓度太高,建议拉梯度,一般50ul体系放0.15pmol就够了

谢谢你!我降低浓度了确实有效
耐心,细心,信心缺一不可
3楼2012-06-07 23:46:40
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zmeng

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
引物浓度太高,建议拉梯度,一般50ul体系放0.15pmol就够了
2楼2012-06-06 17:19:31
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