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yanshouxia

新虫 (初入文坛)

[求助] 紫外最大吸收峰 200nm

在做一种生物碱,最大吸收峰在在210nm,吸光度A在3左右。。但是,稀释25倍后变为200nm,吸光度A在2点多。。可以用么?再稀释25倍,200nm的峰就没有了,190nm的A还在1点多。。能用作紫外检测么?
200nm有峰,是不是末端吸收造成的?末端吸收,不是说没有峰的么。。
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痴夷子皮

版主 (文坛精英)

老痞

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
leecius: 金币+1, 谢谢! 2012-06-04 09:16:39
很明显的末端吸收造成的。末端吸收呈(左)上升趋势。。。
守候在风中的宁静。
2楼2012-06-04 08:52:43
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guomingjuan

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
豆哥: 金币+2, 谢谢参与交流 2012-06-06 08:50:30
是末端吸收造成的,如果选用HPLC的紫外检测波长的话,做好选用205的波长,因为190,200的波长基线很难平稳,即使新仪器平稳很快,但是随着光路的老化,以后可能也会遇到问题;还有就是流动相里面有缓冲盐的话,对低波长下的基线平稳也有影响,可以适当的往高波长移动一些,在吸收坡上也可以,但是不要移动到吸收平稳的地方去
3楼2012-06-06 08:49:43
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yanshouxia

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by guomingjuan at 2012-06-06 08:49:43
是末端吸收造成的,如果选用HPLC的紫外检测波长的话,做好选用205的波长,因为190,200的波长基线很难平稳,即使新仪器平稳很快,但是随着光路的老化,以后可能也会遇到问题;还有就是流动相里面有缓冲盐的话,对低波 ...

样品的吸光度在3左右,这时的最大吸收峰波长能用么?我问了问老师,老师说样品的最大吸收峰的A要在0.8-0.2。可是,我再稀释,也下不到0.8。另一个标准品或是干脆没有峰了。。
4楼2012-06-06 11:45:57
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gwmgyp

版主 (知名作家)

搬砖将

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

摸好条件,用示差检测器吧,检测含量时灵敏度还是够的!
gwmgyp
5楼2012-06-08 18:55:31
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guomingjuan

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

吸光度在3左右是不行的,正如你老师说的,要在0.3~0.7之内。看样子这个物质用紫外检测的话,不太好选波长,如果选用HPLC的话,可以试一下ELSD检测器,那是针对没有紫外吸收物质的通用型检测器。
6楼2012-06-11 10:34:01
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xf350093144

木虫 (小有名气)

同求啊,我请问你们检测的时候用的溶剂是什么啊?我用氯仿萃取之后直接比色法,总是很不稳定,求解啊!
7楼2013-11-16 23:24:04
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