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松松一号

木虫 (正式写手)

[求助] 克隆真菌的未知基因一定需要cDNA吗

最近在看一些文献，克隆真菌的未知基因时一般都是先提RNA，在反转录成cDNA，然后以cDNA为模版，设计引物PCR。
也有部分是提取基因组DNA作为模版，设计引物PCR，想问一下这两种有什么区别，或者哪个是正确的？
谢谢。
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try try ! Day Day comfortable……
1楼 2012-06-01 13:36:41
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liuyu_sdili

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
松松一号: 金币+5, ★★★★★最佳答案, 嗯嗯，看专业以后可以多交流啊。 2012-06-02 10:55:35
这个需要具体情况具体分析，我克隆过黑曲霉葡萄糖氧化酶的基因，NCBI上的这个基因都没有内含子，所以我直接用基因组P，P出来测序也没有内含子，但我对面的那位做青霉的半乳糖苷酶，NCBI上的序列有六七个内含子，所以她的就比较麻烦~~~
你的基因要是从没人做过，那还是老老实实做反转录吧~~~
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2楼2012-06-01 17:21:26
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大brain

银虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by liuyu_sdili at 2012-06-01 17:21:26
这个需要具体情况具体分析，我克隆过黑曲霉葡萄糖氧化酶的基因，NCBI上的这个基因都没有内含子，所以我直接用基因组P，P出来测序也没有内含子，但我对面的那位做青霉的半乳糖苷酶，NCBI上的序列有六七个内含子，所以 ...

请问，待克隆基因的启动子会被一起反转录成cDNA吗？

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态度很重要
3楼2015-11-01 23:35:17
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zhangyao7255

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 大brain at 2015-11-01 23:35:17
请问，待克隆基因的启动子会被一起反转录成cDNA吗？
...

当然不能了啊

发自小木虫Android客户端
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4楼2015-11-01 23:46:02
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