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卡恩

木虫 (小有名气)

[求助] MTT实验配制黄酮溶液

做MTT实验,药物是黄酮,但是黄酮水溶性不好,看资料一般都是用0.1%DMSO溶的。是取99.9mlPBS加0.1mlDMSO混合后,再溶解药物,过滤除菌。还是先用DMSO配制黄酮溶液,然后取0.1ml加入99.9mlPBS中。希望做过的前辈指导一下。比如:槲皮素浓度80umol/L。应该如何配制。
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日耳曼万岁
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小神-小神

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
卡恩: 金币+7, ★★★很有帮助, 谢谢 2012-06-01 19:45:33
槲皮素分子量为302,你的总量是8umol,也就是说2416ug=2.416mg,溶解于100ulDMSO是完全可以的。再加PBS稀释成1000umol/L的储备液,等到用的时候用培养基稀释成你要的工作浓度。
纵横四海
5楼2012-06-01 11:09:32
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普通回帖

liyangmiscap

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
卡恩: 金币+3, 有帮助, 配100ml,DMSO只能加到0.1ml,8umol槲皮素能溶0.1mlDMSO吗? 2012-05-31 21:38:22
先用DMSO溶解黄酮,再少量多次加入PBS,定量至所需浓度,过滤除菌即可使用了
愿与你携手,沿河看柳
2楼2012-05-31 21:31:24
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yqbter

至尊木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
卡恩: 金币+10, ★★★★★最佳答案, 谢谢 2012-06-01 18:53:48
直接用DMSO配置成1000X的贮存液,不需要除菌了,因为DMSO本身可以杀菌的。给药时,用培养基稀释成所需浓度(1000倍)就可以了!
比如槲皮素浓度80umol/L。先用DMSO配制成80mM的贮存液,给药时,直接用培养基稀释成80uM,加到培养板里就可以了!
3楼2012-06-01 08:09:51
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liyangmiscap

木虫 (著名写手)

我没有配制过黄酮类的溶液,槲皮素在DMSO中溶解性很好吧?
愿与你携手,沿河看柳
4楼2012-06-01 08:32:35
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小神-小神

木虫 (正式写手)

DMSO溶解后,储备液为1000umol/L你再加PBS使终体积到8ml。
纵横四海
6楼2012-06-01 11:12:26
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卡恩

木虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by liyangmiscap at 2012-06-01 08:32:35
我没有配制过黄酮类的溶液,槲皮素在DMSO中溶解性很好吧?

谢谢
日耳曼万岁
7楼2012-06-01 18:54:04
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卡恩

木虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by yqbter at 2012-06-01 08:09:51
直接用DMSO配置成1000X的贮存液,不需要除菌了,因为DMSO本身可以杀菌的。给药时,用培养基稀释成所需浓度(1000倍)就可以了!
比如槲皮素浓度80umol/L。先用DMSO配制成80mM的贮存液,给药时,直接用培养基稀释成 ...

做MTT时,DMSO最高浓度能到多少?要是配到合适的药物浓度,发现DMSO含量5% ,能做MTT吗?
日耳曼万岁
8楼2012-06-01 19:52:13
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Alisa_lin

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
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卡恩: 金币+3, 有帮助 2012-06-03 08:13:44
5%浓度太高,培养基DMSO 含量要小于0.5%
9楼2012-06-02 21:00:33
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卡恩

木虫 (小有名气)

引用回帖:
9楼: Originally posted by Alisa_lin at 2012-06-02 21:00:33
5%浓度太高,培养基DMSO 含量要小于0.5%

那我要是配80umol/L的槲皮素,DMSO不超过0.1%,该怎么配。
日耳曼万岁
10楼2012-06-03 08:15:06
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