24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 2481  |  回复: 15
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

分子结构

金虫 (小有名气)

[求助] 今天你纯化蛋白了吗?跪求柱子挂不好的原因。。。。 已有1人参与

最近纯化蛋白,各种柱子搞得晚上睡觉都在过柱子。。。。做过纯化的童鞋,你们懂的。。。。。。
但是最近结果总不理想,我将样品脱盐后过Hitrap Q FF柱,穿透(前两个收集管中)中有时会有酶活,然后在第7、8、9管(盐浓度是14%左右)中我的蛋白就洗下来了,这种状况让我真的有点无能为力了。都不知道是何原因,该如何改进,我升高过pH,也挂不住。
我的缓冲液:20mM tris-hcl, 2MNacl+20mMtris-hcl.
希望各位纯化专家能给我解答一下,谢谢。。。。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

永远不要为失去的感到遗憾——你没有摘到的,只是春天的一朵花,整个春天还是你的。
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

分子结构

金虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by 冼亮淀粉酶 at 2012-06-02 00:13:13
流程什么的说清楚一些,比如说pH多少的时候酶活力怎么分布,设定的电导率如何而实际上测得为多少。

10楼2012-06-02 18:05:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 16 个回答

分子结构

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by sunsicheng at 2012-05-31 10:29:25
加油...

谢谢
永远不要为失去的感到遗憾——你没有摘到的,只是春天的一朵花,整个春天还是你的。
3楼2012-05-31 10:41:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zxc6884

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
zhang8826857: 金币+3, 欢迎来微生物板块交流哦^_^ 2012-06-02 10:40:57
你样品是什么成分?细胞破碎液?硫酸铵沉淀脱盐后?还是其它?
可能是过载了,不一定是你的蛋白过载,而是其它物质结合比你蛋白结合强,导致你的样品挂柱很少。
可以试下SP、或CM阳离子交换。或者高盐条件下去过疏水柱
关注我关注的
4楼2012-06-01 19:10:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

分子结构

金虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by zxc6884 at 2012-06-01 19:10:50
你样品是什么成分?细胞破碎液?硫酸铵沉淀脱盐后?还是其它?
可能是过载了,不一定是你的蛋白过载,而是其它物质结合比你蛋白结合强,导致你的样品挂柱很少。
可以试下SP、或CM阳离子交换。或者高盐条件下去过疏 ...

纤维素酶粗酶液,经硫铵沉淀后脱盐的样品上柱。试过SP挂不上,无限郁闷中。
永远不要为失去的感到遗憾——你没有摘到的,只是春天的一朵花,整个春天还是你的。
5楼2012-06-01 19:30:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 考研调剂 +8 小蜡新笔 2026-03-29 8/400 2026-03-31 18:20 by lizhi8172
[考研] 322求调剂:一志愿湖南大学 材料与化工(085600),已过六级。 +10 XX小邓 2026-03-29 10/500 2026-03-31 16:46 by 不吃魚的貓
[考研] 317求调剂 +12 蛋黄咸肉粽 2026-03-26 13/650 2026-03-31 16:44 by asdfzly
[考研] 271求调剂 +5 勒布朗@ 2026-03-31 7/350 2026-03-31 16:26 by hypershenger
[考研] 物理学调剂 +4 小羊36 2026-03-30 4/200 2026-03-31 16:16 by lishahe
[考研] 材料调剂 5+5 想要一壶桃花水 2026-03-25 11/550 2026-03-31 13:34 by Huaxue_Wang
[考研] 总分322求生物学/生化与分子/生物信息学相关调剂 +6 星沉uu 2026-03-26 7/350 2026-03-31 10:19 by GdShizy
[考研] 22408 359分调剂 +4 Qshers 2026-03-27 8/400 2026-03-31 08:53 by Qshers
[考研] 一志愿郑大材料工程290求调剂 +12 Youth_ 2026-03-30 12/600 2026-03-31 03:34 by 蒙奇奇521
[考研] 370求调剂 +3 080700调剂 2026-03-30 3/150 2026-03-31 01:09 by A_Zhe
[考研] 食品工程专硕一志愿中海洋309求调剂 +5 小张zxy张 2026-03-26 10/500 2026-03-31 00:29 by jp9609
[考研] 085701环境工程求调剂 +11 多久上课 2026-03-27 12/600 2026-03-30 21:21 by 研究僧导导
[考研] 一志愿华中师范化学332分求调剂 +3 Lyy930824@ 2026-03-29 3/150 2026-03-30 20:15 by DHUSHUAI
[考研] 材料化工340求调剂 +3 jhx777 2026-03-30 3/150 2026-03-30 17:54 by JourneyLucky
[考研] 0703 化学 求调剂,一志愿山东大学 342 分 +7 Shern—- 2026-03-28 7/350 2026-03-30 16:31 by nothing投稿中
[考研] 求调剂 +6 芦lty 2026-03-25 7/350 2026-03-28 13:13 by 唐沐儿
[考研] 339求调剂,想调回江苏 +6 烤麦芽 2026-03-27 8/400 2026-03-28 10:40 by 烤麦芽
[考研] 一志愿南师大0703化学 275求调剂 +4 Ripcord上岸 2026-03-27 4/200 2026-03-27 17:00 by zhyzzh
[考研] 考研一志愿苏州大学初始315(英一)求调剂 +3 sbdksD 2026-03-24 4/200 2026-03-25 18:16 by xcjcqu
[考研] 302求调剂 +4 锦衣卫藤椒 2026-03-25 4/200 2026-03-25 16:29 by 功夫疯狂
信息提示
请填处理意见