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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 构建克隆载体时出现的问题
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dajiong

金虫 (正式写手)

[求助] 构建克隆载体时出现的问题

从蓝白筛选过的平板上挑了三个阳性单克隆，摇菌过夜，第二天分别取菌液用PCR鉴定，发现只有一个出来了目的片段（1000bp左右的）。还有一个有片段但是只有500bp，还有一个压根没有目的片段……胶什么的都没问题，想知道是在哪一步出了问题。谢谢！
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哦也
1楼 2012-05-24 13:11:27
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jimmy7633

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
蓝白斑筛选本身阳性率就没有百分之百，菌落PCR也只是初步鉴定，需要酶切鉴定，测序正确才行。
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dajiong
6楼2012-05-24 18:22:56
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