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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 纳豆芽孢杆菌在摇瓶里不产生芽孢
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han_0532

木虫 (小有名气)

[交流] 纳豆芽孢杆菌在摇瓶里不产生芽孢

最近一段时间在做纳豆芽孢杆菌的研究，目的是产生大量的芽孢做为益生菌。首先摸索了一下是在5L的小罐里，用斜面接种，然后发酵，有的时候挺好，产大量的芽孢，有的时候也有不产芽孢或者是菌体成链状，镜检和斜面有区别，估计是染菌，但又感觉不像，因为首先空消了2个小时后又灭菌40min，应该比较彻底。
现在想优化一下培养基，因为实验次数比较多，想先在摇瓶里优化后再上罐验证。现在转速280r/min，培养37℃，500ml三角瓶装液量50ml-100ml，但是做了几次都不产生芽孢。估计是摇瓶溶氧不如小罐，但是这样也不应该一个芽孢也没有啊，镜检了几十个片子，一个芽孢都没有。不是染色技术的问题，因为已经做过上千次芽孢染色了，很有经验。
有没有做同样研究的，产芽孢的同仁大家讨论交流一下。

[ Last edited by han_0532 on 2012-5-20 at 19:46 ]
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1楼 2012-05-20 19:20:26
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

Dannel_yan

新虫 (初入文坛)
★
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加一点金属离子试试，尤其是锰离子，应该对产芽孢很有效
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9楼2012-12-24 21:37:34
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vxuc28

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
你好，我也是是做纳豆芽孢杆菌发酵的，今年研一，但是由于刚开始做不太会，能否请教你关于纳豆芽孢杆菌培养基以及活菌计数的问题
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11楼2014-06-27 15:40:45
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普通回帖

vizy

金虫 (正式写手)
★ ★
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han_0532: 金币+1 2012-05-20 21:13:18
有可能养的时间不够呢。没做你说的那个，不过以前也做过芽孢染色之类的，要到一定的时间才会产生芽孢。专门取样观察过。
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2楼2012-05-20 21:09:44
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han_0532

木虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by vizy at 2012-05-20 21:09:44:
有可能养的时间不够呢。没做你说的那个，不过以前也做过芽孢染色之类的，要到一定的时间才会产生芽孢。专门取样观察过。

培养了72个小时也没有长。用普通的牛肉膏蛋白胨培养基，应该早耗尽了吧。在小罐上24个小时，比较好的时候就有80%左右的芽孢。
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3楼2012-05-20 21:14:58
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damaomao

禁虫 (正式写手)
★
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本帖内容被屏蔽
4楼2012-05-21 10:56:04
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武安人

金虫 (正式写手)
应该试试固态发酵呀。
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5楼2012-05-21 12:35:25
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thiophene9859

金虫 (小有名气)
★ ★
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han_0532: 金币+1 2012-05-22 18:33:00
芽孢是在逆境中产生的，只有条件不适宜菌体生长，才会产芽孢，发酵罐通气较好，营养物质消耗快，营养耗尽后会产芽孢会产芽孢。
另外有的菌体芽孢形成受群体效应调控，菌体浓度达不到，信号分子积累不够，就可能不产或少产芽孢。
个人经验，经供参考。
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6楼2012-05-21 12:48:23
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thiophene9859

金虫 (小有名气)
★ ★
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han_0532: 金币+1 2012-05-22 18:33:04
降低培养基中氮源或者碳源浓度，一般会使产芽孢时间提前，但同时菌体浓度也上不去。
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7楼2012-05-21 12:51:36
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javadig

至尊木虫 (著名写手)
★
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芽孢是在菌体生长条件恶化时才出现的。建议在对数期人为改变理化条件，例如大幅降低pH，呵呵。
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8楼2012-05-23 11:57:58
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haomayan

铁虫 (小有名气)
★
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楼主，你好！ 本人准备做些关于纳豆芽孢杆菌的实验，可否问你要这个菌种。谢谢啦。我准备做点基础的实验，怕买来的活性不好，影响实验结果，你这个经常用的，效果应该不会错的。如果不方便给，那我们一起交流探讨可以吗，谢谢，期待回复！
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10楼2013-08-23 10:32:14
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枯草芽孢

木虫 (小有名气)
★
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送红花一朵
应该和培养基配方有关。“500ml三角瓶装液量50ml-100ml”装量太多了。
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12楼2015-07-03 09:53:32
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芽孢发酵刘

新虫 (初入文坛)
★
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装液量少点  培养时间长点   实在还不长芽孢   培养基成分减半

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13楼2016-01-23 14:30:06
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安子琪14楼
2017-01-09 16:39   回复  
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