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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 纳豆芽孢杆菌在摇瓶里不产生芽孢
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han_0532

木虫 (小有名气)

[交流] 纳豆芽孢杆菌在摇瓶里不产生芽孢

最近一段时间在做纳豆芽孢杆菌的研究，目的是产生大量的芽孢做为益生菌。首先摸索了一下是在5L的小罐里，用斜面接种，然后发酵，有的时候挺好，产大量的芽孢，有的时候也有不产芽孢或者是菌体成链状，镜检和斜面有区别，估计是染菌，但又感觉不像，因为首先空消了2个小时后又灭菌40min，应该比较彻底。
现在想优化一下培养基，因为实验次数比较多，想先在摇瓶里优化后再上罐验证。现在转速280r/min，培养37℃，500ml三角瓶装液量50ml-100ml，但是做了几次都不产生芽孢。估计是摇瓶溶氧不如小罐，但是这样也不应该一个芽孢也没有啊，镜检了几十个片子，一个芽孢都没有。不是染色技术的问题，因为已经做过上千次芽孢染色了，很有经验。
有没有做同样研究的，产芽孢的同仁大家讨论交流一下。

[ Last edited by han_0532 on 2012-5-20 at 19:46 ]
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1楼 2012-05-20 19:20:26
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thiophene9859

金虫 (小有名气)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
han_0532: 金币+1 2012-05-22 18:33:04
降低培养基中氮源或者碳源浓度，一般会使产芽孢时间提前，但同时菌体浓度也上不去。
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7楼2012-05-21 12:51:36
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vizy

金虫 (正式写手)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
han_0532: 金币+1 2012-05-20 21:13:18
有可能养的时间不够呢。没做你说的那个，不过以前也做过芽孢染色之类的，要到一定的时间才会产生芽孢。专门取样观察过。
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2楼2012-05-20 21:09:44
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han_0532

木虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by vizy at 2012-05-20 21:09:44:
有可能养的时间不够呢。没做你说的那个，不过以前也做过芽孢染色之类的，要到一定的时间才会产生芽孢。专门取样观察过。

培养了72个小时也没有长。用普通的牛肉膏蛋白胨培养基，应该早耗尽了吧。在小罐上24个小时，比较好的时候就有80%左右的芽孢。
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3楼2012-05-20 21:14:58
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damaomao

禁虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
本帖内容被屏蔽
4楼2012-05-21 10:56:04
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安子琪14楼
2017-01-09 16:39   回复  
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