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han_0532

木虫 (小有名气)


[交流] 纳豆芽孢杆菌在摇瓶里不产生芽孢

最近一段时间在做纳豆芽孢杆菌的研究,目的是产生大量的芽孢做为益生菌。首先摸索了一下是在5L的小罐里,用斜面接种,然后发酵,有的时候挺好,产大量的芽孢,有的时候也有不产芽孢或者是菌体成链状,镜检和斜面有区别,估计是染菌,但又感觉不像,因为首先空消了2个小时后又灭菌40min,应该比较彻底。
现在想优化一下培养基,因为实验次数比较多,想先在摇瓶里优化后再上罐验证。现在转速280r/min,培养37℃,500ml三角瓶装液量50ml-100ml,但是做了几次都不产生芽孢。估计是摇瓶溶氧不如小罐,但是这样也不应该一个芽孢也没有啊,镜检了几十个片子,一个芽孢都没有。不是染色技术的问题,因为已经做过上千次芽孢染色了,很有经验。
有没有做同样研究的,产芽孢的同仁大家讨论交流一下。

[ Last edited by han_0532 on 2012-5-20 at 19:46 ]
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thiophene9859

金虫 (小有名气)


★ ★
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han_0532: 金币+1 2012-05-22 18:33:00
芽孢是在逆境中产生的,只有条件不适宜菌体生长,才会产芽孢,发酵罐通气较好,营养物质消耗快,营养耗尽后会产芽孢会产芽孢。
另外有的菌体芽孢形成受群体效应调控,菌体浓度达不到,信号分子积累不够,就可能不产或少产芽孢。
个人经验,经供参考。
6楼2012-05-21 12:48:23
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vizy

金虫 (正式写手)


★ ★
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han_0532: 金币+1 2012-05-20 21:13:18
有可能养的时间不够呢。没做你说的那个,不过以前也做过芽孢染色之类的,要到一定的时间才会产生芽孢。专门取样观察过。
2楼2012-05-20 21:09:44
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han_0532

木虫 (小有名气)


引用回帖:
2楼: Originally posted by vizy at 2012-05-20 21:09:44:
有可能养的时间不够呢。没做你说的那个,不过以前也做过芽孢染色之类的,要到一定的时间才会产生芽孢。专门取样观察过。

培养了72个小时也没有长。用普通的牛肉膏蛋白胨培养基,应该早耗尽了吧。在小罐上24个小时,比较好的时候就有80%左右的芽孢。
3楼2012-05-20 21:14:58
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damaomao

禁虫 (正式写手)

★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
本帖内容被屏蔽

4楼2012-05-21 10:56:04
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安子琪14楼
2017-01-09 16:39   回复  
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