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zdj417802092

金虫 (小有名气)

[求助] 微柱离心法无法洗脱脂质体的原因

我最近用微柱离心法做空白脂质体的洗脱曲线,用的是葡聚糖凝胶G-50,每天柱子都是新做的,用的是2.5ml注射器做的凝胶柱,柱高大约3.5cm,现在就是无法将脂质体洗脱下来,用4000rpm也还是无法洗脱!
    我分析了下原因,有可能是我的脂质体粒径太大,除了这个原因外,我还想问下论坛里的大哥大姐还有什么其他的原因!
    小弟谢谢大家先了!
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yanling3083

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

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zdj417802092: 金币+2, 有帮助, 我说的洗脱不下来是指离心30min后在凝胶柱上面还有洗脱液,液面下降很慢,且离心管中收集不了多少液体!我葡聚糖凝胶是用蒸馏水溶胀24小时后装柱的,是瑞典法玛西亚公司的G-50凝胶! 2012-05-18 18:00:01
leecius: 金币+1, 谢谢! 2012-05-21 08:56:41
首先楼主所说的无法洗脱是指什么呢?脂质体完全洗脱不下来还是回收率不合格?完全洗脱不下来不太可能吧,即使脂质体粒径很大可能性也不大,因为粒径越大越容易洗脱下来。还有就是你的凝胶处理是否正确?
2楼2012-05-18 14:09:07
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yanling3083

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


xiaoxiao270: 金币+1, 3Q 2012-05-21 12:40:29
引用回帖:
2楼: Originally posted by yanling3083 at 2012-05-18 14:09:07:
首先楼主所说的无法洗脱是指什么呢?脂质体完全洗脱不下来还是回收率不合格?完全洗脱不下来不太可能吧,即使脂质体粒径很大可能性也不大,因为粒径越大越容易洗脱下来。还有就是你的凝胶处理是否正确?

那你加样之前将凝胶柱的水离掉了吗?我们一般是装柱后3000rpm离心3min将水去掉,然后上样大概100ul的样子,3000rpm离心3min,然后再用水或5%葡萄糖溶液分次洗脱,大概一次洗脱液也只上100ul,只是可以多次洗脱。
3楼2012-05-21 08:53:16
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