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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药剂学 » 脂质体制备方面的问题
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zjlqingdao

木虫 (正式写手)

[交流] 脂质体制备方面的问题 已有1人参与

本人新手在做空白脂质体，发现一些问题，首先我用的是卵磷脂s80和胆固醇，有机溶剂用的是氯仿和无水乙醇共5ml（4：1），水化用的是蒸馏水，水浴50度悬蒸1小时。在这里想问大家关于卵磷脂和胆固醇比例的问题，在哪个比例范围内，作出的空白脂质体的粒径会在100nm作用，另听别人说单纯用氯仿不好，说是挥发太快，所以我用了些无水乙醇，有这个说法吗？另外用蒸馏水水化和用PBS和乳酸盐缓冲容易水化有什么区别，请教了谢谢
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1楼 2009-07-24 15:03:20
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

anoikis

木虫 (正式写手)
★ ★ ★
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karl2100(金币+2,VIP+0):多谢指教！ 8-11 21:05
引用回帖:
Originally posted by zjlqingdao at 2009-7-24 15:03:
本人新手在做空白脂质体，发现一些问题，首先我用的是卵磷脂s80和胆固醇，有机溶剂用的是氯仿和无水乙醇共5ml（4：1），水化用的是蒸馏水，水浴50度悬蒸1小时。在这里想问大家关于卵磷脂和胆固醇比例的问题，在哪 ...

提3点建议：
1 试试氯仿和甲醇（2：1）做为有机溶剂，薄膜水化成膜比较关键，所以有机溶剂可以稍微多加一点，这样成膜可以更加均匀。
2 水浴50度1小时不够，有机溶剂残留对脂质体成膜肯定有影响，建议2小时，压强上来不要太小，建议梯度减小。
3 软磷脂和胆固醇比例的筛选要根据药物来决定，做空白脂质体来决定其比例，意义不大。所以建议制备含药脂质体，用正交设计来决定卵磷脂和药物比例以及卵磷脂和胆固醇比例。
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5楼2009-08-07 21:01:04
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anoikis

木虫 (正式写手)
★
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Originally posted by zjlqingdao at 2009-8-7 21:13:
我最近要测量包封率，想要用微柱离心法，但是药物是脂溶性的，用的是G50填料的柱子，用蒸馏水做洗脱液可以吗。但是教科书关于凝胶排阻洗脱液的选择必须要用能够溶解药物的。但是如果我的药物和水能够形成氢键，可 ...

最好用PBS，里面可以加点Nacl。
形成氢键不影响测定，但这种情况我建议你用离心凝胶柱法。具体可以看现代药剂学page800。
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10楼2009-08-07 21:39:27
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普通回帖

火燛燛

木虫 (著名写手)
★
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Originally posted by zjlqingdao at 2009-7-24 15:03:
本人新手在做空白脂质体，发现一些问题，首先我用的是卵磷脂s80和胆固醇，有机溶剂用的是氯仿和无水乙醇共5ml（4：1），水化用的是蒸馏水，水浴50度悬蒸1小时。在这里想问大家关于卵磷脂和胆固醇比例的问题，在哪 ...

ding
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2楼2009-07-25 19:42:30
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脂质体3755

银虫 (小有名气)
卵磷脂和胆固醇比例比例要实验考察，过膜整粒就可达100nm。PBS盐缓冲液比较稳定不容易受酸碱的影响
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3楼2009-08-07 20:20:58
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zjlqingdao

木虫 (正式写手)
学习了谢谢
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4楼2009-08-07 20:30:05
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anoikis

木虫 (正式写手)
另外，至于用蒸馏水水化还是pBS缓冲盐水化的问题，还要考虑几个方面
1 脂质体磷脂双层膜的带电性
2 药物及脂材在不同pH值下的稳定性
3 注射用脂质体还要考虑等渗问题。

建议都试试，考察一下粒径和zeta电位的变化以及物理稳定性（至少一周）
然后决定用那种溶剂体系。
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6楼2009-08-07 21:05:30
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zjlqingdao

木虫 (正式写手)

谢谢哈哈dark

哈哈，说的好详细呀，又向你学习了
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7楼2009-08-07 21:12:52
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zjlqingdao

木虫 (正式写手)
我最近要测量包封率，想要用微柱离心法，但是药物是脂溶性的，用的是G50填料的柱子，用蒸馏水做洗脱液可以吗。但是教科书关于凝胶排阻洗脱液的选择必须要用能够溶解药物的。但是如果我的药物和水能够形成氢键，可以用水洗脱吗

[ Last edited by zjlqingdao on 2009-8-7 at 21:19 ]
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8楼2009-08-07 21:13:34
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zjlqingdao

木虫 (正式写手)
[quote]Originally posted by anoikis at 2009-8-7 21:01:


试试氯仿和甲醇（2：1）做为有机溶剂，


  若是药物与甲醇能够形成氢键，后期甲醇比较难出去吧，另梯度减压。能详细点吗？
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9楼2009-08-07 21:20:55
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