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zjlqingdao

木虫 (正式写手)

[交流] 脂质体制备方面的问题已有1人参与

本人新手在做空白脂质体,发现一些问题,首先我用的是卵磷脂s80和胆固醇,有机溶剂用的是氯仿和无水乙醇共5ml(4:1),水化用的是蒸馏水,水浴50度悬蒸1小时。在这里想问大家关于卵磷脂和胆固醇比例的问题,在哪个比例范围内,作出的空白脂质体的粒径会在100nm作用,另听别人说单纯用氯仿不好,说是挥发太快,所以我用了些无水乙醇,有这个说法吗?另外用蒸馏水水化和用PBS和乳酸盐缓冲容易水化有什么区别,请教了谢谢
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anoikis

木虫 (正式写手)

★ ★ ★
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karl2100(金币+2,VIP+0):多谢指教! 8-11 21:05
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Originally posted by zjlqingdao at 2009-7-24 15:03:
本人新手在做空白脂质体,发现一些问题,首先我用的是卵磷脂s80和胆固醇,有机溶剂用的是氯仿和无水乙醇共5ml(4:1),水化用的是蒸馏水,水浴50度悬蒸1小时。在这里想问大家关于卵磷脂和胆固醇比例的问题,在哪 ...

提3点建议:
1 试试氯仿和甲醇(2:1)做为有机溶剂,薄膜水化成膜比较关键,所以有机溶剂可以稍微多加一点,这样成膜可以更加均匀。
2 水浴50度1小时不够,有机溶剂残留对脂质体成膜肯定有影响,建议2小时,压强上来不要太小,建议梯度减小。
3 软磷脂和胆固醇比例的筛选要根据药物来决定,做空白脂质体来决定其比例,意义不大。所以建议制备含药脂质体,用正交设计来决定卵磷脂和药物比例以及卵磷脂和胆固醇比例。
5楼2009-08-07 21:01:04
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anoikis

木虫 (正式写手)


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Originally posted by zjlqingdao at 2009-8-7 21:13:
我最近要测量包封率,想要用微柱离心法,但是药物是脂溶性的,用的是G50填料的柱子,用蒸馏水做洗脱液可以吗。但是教科书关于凝胶排阻洗脱液的选择必须要用能够溶解药物的。但是如果我的药物和水能够形成氢键,可 ...

最好用PBS,里面可以加点Nacl。
形成氢键不影响测定,但这种情况我建议你用离心凝胶柱法。具体可以看现代药剂学page800。
10楼2009-08-07 21:39:27
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普通回帖

火燛燛

木虫 (著名写手)


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Originally posted by zjlqingdao at 2009-7-24 15:03:
本人新手在做空白脂质体,发现一些问题,首先我用的是卵磷脂s80和胆固醇,有机溶剂用的是氯仿和无水乙醇共5ml(4:1),水化用的是蒸馏水,水浴50度悬蒸1小时。在这里想问大家关于卵磷脂和胆固醇比例的问题,在哪 ...

ding
2楼2009-07-25 19:42:30
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脂质体3755

银虫 (小有名气)

卵磷脂和胆固醇比例比例要实验考察,过膜整粒就可达100nm。PBS盐缓冲液比较稳定不容易受酸碱的影响
3楼2009-08-07 20:20:58
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zjlqingdao

木虫 (正式写手)

学习了谢谢
4楼2009-08-07 20:30:05
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anoikis

木虫 (正式写手)

另外,至于用蒸馏水水化还是pBS缓冲盐水化的问题,还要考虑几个方面
1 脂质体磷脂双层膜的带电性
2 药物及脂材在不同pH值下的稳定性
3 注射用脂质体还要考虑等渗问题。

建议都试试,考察一下粒径和zeta电位的变化以及物理稳定性(至少一周)
然后决定用那种溶剂体系。
6楼2009-08-07 21:05:30
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zjlqingdao

木虫 (正式写手)

谢谢哈哈dark

哈哈,说的好详细呀,又向你学习了
7楼2009-08-07 21:12:52
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zjlqingdao

木虫 (正式写手)

我最近要测量包封率,想要用微柱离心法,但是药物是脂溶性的,用的是G50填料的柱子,用蒸馏水做洗脱液可以吗。但是教科书关于凝胶排阻洗脱液的选择必须要用能够溶解药物的。但是如果我的药物和水能够形成氢键,可以用水洗脱吗

[ Last edited by zjlqingdao on 2009-8-7 at 21:19 ]
8楼2009-08-07 21:13:34
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zjlqingdao

木虫 (正式写手)

[quote]Originally posted by anoikis at 2009-8-7 21:01:


试试氯仿和甲醇(2:1)做为有机溶剂,


  若是药物与甲醇能够形成氢键,后期甲醇比较难出去吧,另梯度减压。能详细点吗?
9楼2009-08-07 21:20:55
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