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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 做过P450的请进，求帮助
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lilihuang1125

金虫 (初入文坛)

[求助] 做过P450的请进，求帮助 已有1人参与

目前做一个植物P450的体外反应，即把P450基因通过酵母异源表达后，提取微粒体，然后在磷酸钾Buffer中，把底物，微粒体和NADPH一起孵育，一直得不到产物，也尝试过用破碎酵母的总蛋白直接孵育，也以失败告终，不知道哪步出了问题。
基因应该没有问题，因为同时做的体内试验得到了产物。
急，请有经验的同学赐教！！！

[ Last edited by lilihuang1125 on 2012-5-17 at 10:14 ]
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1楼 2012-05-17 09:31:19
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bio_sci

捐助贵宾 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2014-08-03 07:57:48
建议首先确定，重组蛋白有表达吗？光SDS-PAGE电泳不能完全确定，最好是WB再做一下
赞一下 回复此楼
3楼2014-08-02 12:07:50
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