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chenzhenwei0

铜虫 (小有名气)

[求助] 蛋白的斑点杂交能像WERTERN BLOT一样检验蛋白的抗原性吗

我最近在做蛋白表达,一直做免疫印迹都没有显色反应,而我用的对照确有显色带。同时我用蛋白斑点杂交来操作,可见我的蛋白样品和对照的同样有显色斑点,为什么WESTERN BLOT确得不到这样的结果呢,我直接用蛋白的斑点杂交能说明问题不?会不会是我免疫印迹操作有问题,可能出在哪呢,很是苦恼,望高手来指导指导,谢谢了
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chenzhenwei0

铜虫 (小有名气)

没人解答啊 跪求高手出没 谢谢了
4楼2012-05-17 10:32:39
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chenzhenwei0

铜虫 (小有名气)

怎么没有人回复呢?
2楼2012-05-16 15:01:29
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叶倾意

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
[1]DOT-BLOT 在很多地方跟WesternBlot是一样的,但区别在于后者更加精确,后者不仅看出表型结合也能看出目的蛋白分子量,而Dot很容易出现假阳性。我做细胞筛选的时候,也会用DOT& WB,做DOT定量,做WB定性,两者目的是不一样的。
[2]我不太明白什么叫做“对照有显色”,你是指你的阳性样品么?还是内参?
自知者智 自胜者勇 自暴者弃 自强者成
5楼2012-05-18 22:55:02
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chenzhenwei0

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 叶倾意 at 2012-05-18 22:55:02:
DOT-BLOT 在很多地方跟WesternBlot是一样的,但区别在于后者更加精确,后者不仅看出表型结合也能看出目的蛋白分子量,而Dot很容易出现假阳性。我做细胞筛选的时候,也会用DOT& WB,做DOT定量,做WB定性,两者 ...

谢谢你的解答 我的对照是阳性样品 看来很可能是假阳性了啊
6楼2012-05-19 15:57:36
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