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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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wlyanddmj

铜虫 (正式写手)

[交流] 有关Nano drop的一些问题 已有6人参与

单链DNA 4度离心沉淀后,为了测试上清液中有多少核酸损失,我用Nano drop测上清液的浓度,(溶剂是75%乙醇,所以用75%乙醇做的空白)结果很诡异,其中一个样品A280居然为负数,还有一个260/280为127.31,这是怎么回事呀,上清里面到底有木有核酸,量是多少呀……
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dshlove

木虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
8楼: Originally posted by 猫猫不会玩 at 2013-11-26 19:19:40
请问,nano drop 测蛋白准吗?和紫外分光光度计比哪个准确些呢?吸收峰值在哪个范围比较准确?0.1-1.5?A260/280的值有要求吗?谢谢O(∩_∩)O~...

嗯,只能说可信,我们做单子的时候就是以nanodrop数据给他们的。蛋白吸收峰在280,核酸在260,一般蛋白很少看A260/280的值,除非是核酸特别多。一般质粒小提,A260/280的值要控制在1.8-2.0,大了就是核酸多了,少了就是蛋白含量多了。
9楼2013-11-26 20:46:55
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dshlove

木虫 (正式写手)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
小丹木木: 金币+1, 鼓励交流 2012-05-15 15:22:55
A280应该是蛋白多肽的吸收峰,负值很正常,但是负的很多就不正常了。不知道你的是什么情况。
260/280是RNA的指标,127.31,是很大的数值啊,我们一般觉得到2.0以上就很多了,你这只要仪器没问题,那上清肯定都是RNA。
2楼2012-05-15 09:09:21
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longrna

新虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
有醇能测OD吗?即使空白....
建议咨询NanoDrop
伟大航线....
3楼2012-05-15 09:09:27
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xiao7270

至尊木虫 (著名写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
1949stone: , 这么快?? 2012-05-19 15:16:38
75%乙醇做的空白,测的时候早挥发干净了。
4楼2012-05-16 11:20:11
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