24小时热门版块排行榜    

查看: 4095  |  回复: 9

wlyanddmj

铜虫 (正式写手)

[交流] 有关Nano drop的一些问题 已有6人参与

单链DNA 4度离心沉淀后,为了测试上清液中有多少核酸损失,我用Nano drop测上清液的浓度,(溶剂是75%乙醇,所以用75%乙醇做的空白)结果很诡异,其中一个样品A280居然为负数,还有一个260/280为127.31,这是怎么回事呀,上清里面到底有木有核酸,量是多少呀……
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dshlove

木虫 (正式写手)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
小丹木木: 金币+1, 鼓励交流 2012-05-15 15:22:55
A280应该是蛋白多肽的吸收峰,负值很正常,但是负的很多就不正常了。不知道你的是什么情况。
260/280是RNA的指标,127.31,是很大的数值啊,我们一般觉得到2.0以上就很多了,你这只要仪器没问题,那上清肯定都是RNA。
2楼2012-05-15 09:09:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

longrna

新虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
有醇能测OD吗?即使空白....
建议咨询NanoDrop
伟大航线....
3楼2012-05-15 09:09:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiao7270

至尊木虫 (著名写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
1949stone: , 这么快?? 2012-05-19 15:16:38
75%乙醇做的空白,测的时候早挥发干净了。
4楼2012-05-16 11:20:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wlyanddmj

铜虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by xiao7270 at 2012-05-16 11:20:11:
75%乙醇做的空白,测的时候早挥发干净了。

啊!才两秒中的时间诶
5楼2012-05-16 11:27:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xmuring

木虫 (著名写手)


★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
1949stone: 金币+2, 鼓励 2012-05-19 15:17:07
我们提质粒纯化质粒的时候都要先把乙醇挥发干净再加溶剂溶解DNA,感觉乙醇的存在会干扰DNA浓度测定。。。你可以尝试下用超纯水做空白,扫一下乙醇的谱图,看一下它的吸收情况,排除溶剂的影响再想其他的办法
6楼2012-05-18 20:15:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wlyanddmj

铜虫 (正式写手)

引用回帖:
6楼: Originally posted by xmuring at 2012-05-18 20:15:06:
我们提质粒纯化质粒的时候都要先把乙醇挥发干净再加溶剂溶解DNA,感觉乙醇的存在会干扰DNA浓度测定。。。你可以尝试下用超纯水做空白,扫一下乙醇的谱图,看一下它的吸收情况,排除溶剂的影响再想其他的办法

好的,谢了!
7楼2012-05-19 13:59:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

猫猫不会玩

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
2楼: Originally posted by dshlove at 2012-05-15 09:09:21
A280应该是蛋白多肽的吸收峰,负值很正常,但是负的很多就不正常了。不知道你的是什么情况。
260/280是RNA的指标,127.31,是很大的数值啊,我们一般觉得到2.0以上就很多了,你这只要仪器没问题,那上清肯定都是RN ...

请问,nano drop 测蛋白准吗?和紫外分光光度计比哪个准确些呢?吸收峰值在哪个范围比较准确?0.1-1.5?A260/280的值有要求吗?谢谢O(∩_∩)O~
8楼2013-11-26 19:19:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dshlove

木虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
8楼: Originally posted by 猫猫不会玩 at 2013-11-26 19:19:40
请问,nano drop 测蛋白准吗?和紫外分光光度计比哪个准确些呢?吸收峰值在哪个范围比较准确?0.1-1.5?A260/280的值有要求吗?谢谢O(∩_∩)O~...

嗯,只能说可信,我们做单子的时候就是以nanodrop数据给他们的。蛋白吸收峰在280,核酸在260,一般蛋白很少看A260/280的值,除非是核酸特别多。一般质粒小提,A260/280的值要控制在1.8-2.0,大了就是核酸多了,少了就是蛋白含量多了。
9楼2013-11-26 20:46:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

swallow3002

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
不能用酒精做Blank的,亲。
10楼2014-09-04 00:22:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 wlyanddmj 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 今天维护系统维护 祝所有人 高中 +4 gjjjzhong 2026-08-18 5/250 2026-08-18 12:18 by ziyangfang
[基金申请] 欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律 +44 医学老男孩 2026-08-13 98/4900 2026-08-18 12:14 by wenky
[基金申请] 2027广东省杰青 +3 奶牛小黑 2026-08-15 8/400 2026-08-18 11:47 by gltch
[基金申请] 快农历七夕节了,轻松一下,男人悄悄话,女施主请不要进来。 +4 Tide man 2026-08-14 5/250 2026-08-18 11:35 by Tide man
[论文投稿] 投稿咨询 +4 wwm09 2026-08-17 5/250 2026-08-18 11:25 by 無關想念
[基金申请] 时间戳变了,能看出什么问题? +5 基诺咪客 2026-08-17 6/300 2026-08-18 11:06 by hunter无悔
[基金申请] 93BebMhtakh前后11位开头都是大写 +4 且听虎啸 2026-08-17 5/250 2026-08-18 00:49 by 蔡棒棒菂
[基金申请] 感觉是下周放榜了 +6 angus9576 2026-08-17 11/550 2026-08-17 23:57 by angus9576
[基金申请] filecode=后面第一个是大写字母 +8 wangze12014 2026-08-14 10/500 2026-08-17 17:05 by xter9665
[基金申请] 今天系统多次维护,明天很可能放榜! +8 zju2000 2026-08-16 9/450 2026-08-17 12:20 by lmz0216
[基金申请] 咱们一起用铁证分析2026国家社科基金中标与否 +7 启萌科技 2026-08-12 26/1300 2026-08-16 12:35 by 启萌科技
[精细化工] 招聘 金属平磨液,抛光液研发工程师 +3 小天0311 2026-08-14 3/150 2026-08-16 07:31 by H9PLUS
[基金申请] 各位道友,我要去昆明玩几天,回来见。 +7 Tide man 2026-08-14 8/400 2026-08-15 01:11 by arzu_hma
[基金申请] 是这周出结果还是下周出结果? +4 yuleib84 2026-08-11 4/200 2026-08-14 23:05 by lfy8008
[硕博家园] 读博的好处 +4 lnee 2026-08-11 4/200 2026-08-14 10:20 by ahsoarli
[基金申请] 重要来源:本周末出结果 +10 瞬息宇宙 2026-08-12 10/500 2026-08-13 15:46 by likettle
[基金申请] 不应该看fileCode +7 且听虎啸 2026-08-12 9/450 2026-08-13 14:27 by flydreamws
[基金申请] Filecode 又变了,巨变 +3 WH3796 2026-08-12 4/200 2026-08-13 14:13 by 小木虫6752397
[基金申请] 结合人工智能,周易传统文化,filecode打分制来了,3分以上希望很大。 +3 Tide man 2026-08-12 4/200 2026-08-13 08:35 by ZJTJZ
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见,大家看看几个A,几个B? +11 Tide man 2026-08-11 11/550 2026-08-13 07:35 by 撸猫猫
信息提示
请填处理意见