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请教关于MTT脾淋巴细胞增殖问题
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sunshinejiao
新虫
(初入文坛)
BioEPI: 1
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(幼儿园)
金币: 57.2
帖子: 14
在线: 7.9小时
虫号: 1368619
[交流]
请教关于MTT脾淋巴细胞增殖问题
Sample Text
Sample Text
我做脾淋巴细胞增殖实验,无菌取脾,细胞浓度为2*10e6个/ml,96孔板,每孔100μL细胞,加入10μLConA(不同浓度)孵育72小时后,加入MTT(5mg/ml)再孵育4个小时,没有出现甲瓒结晶,在显微镜下观察,细胞还是透亮的,没有发生任何变化。我又做了一次试验,取完脾细胞,孵育20小时,直接加MTT,孵育4h,有甲瓒结晶,但是很少,而且细胞还是透亮的。我想请教各位,脾细胞在96孔板里,死细胞和活细胞怎么区分啊?我那细胞都是透亮的。还有我加入MTT没有甲瓒结晶,能说明我的细胞全部死亡了吗(MTT我用其他细胞验证过,没有问题)?非常感谢各位的回答!
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1楼
2012-05-11 10:36:01
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檀香木2
铁虫
(初入文坛)
应助: 0
(幼儿园)
金币: 43.6
帖子: 10
在线: 56.5小时
虫号: 3127409
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
估计你刺激原浓度太低,我们实验时ConA用进口的,终浓度4微克。
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11楼
2015-04-03 19:46:33
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