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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药代动力学 » HPLC测血药浓度血样处理问题
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vitc

捐助贵宾 (小有名气)

[求助] HPLC测血药浓度血样处理问题

求助各位：准备用HPLC测小鼠的血浓度，用眼眶取血，请问血取出来后，要如何处理，才能上液相。可否给个具体方法。文献中有的提到要用萃取柱什么的，不明白，在这请教大家啦。谢谢
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1楼 2012-05-10 15:04:38
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liuzhaomin

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
豆哥: 金币+1, 谢谢参与交流 2012-05-11 21:14:46
取血后，需要加抗凝剂抗凝，然后离心得血浆
血浆需经沉淀蛋白或者萃取后，才可以进HPLC
先期需要用标准品加入空白血浆中，建立分析方法，具体方法可参考SFDA《化学药物非临床药代动力学研究技术指导原则》
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3楼2012-05-10 15:23:59
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liuzhaomin

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
7楼: Originally posted by 阿娇阿娇 at 2012-05-22 15:35:44:
你好！请问一下如果我的药物是蛋白，血浆该怎么处理，进HPLC呢？

是蛋白还是多肽，多肽我之前做过，蛋白没有接触过，如果你这个药物不是全新的，可以参考一下文献，搜一下：你的药物的英文加上HPLC或plasma，看看之前有没有人建过分析方法。
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8楼2012-05-22 17:17:33
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liuzhaomin

金虫 (著名写手)
引用回帖:
9楼: Originally posted by 阿娇阿娇 at 2012-05-22 18:14:28:
是蛋白质，59KD，文献没有的，是自己构建质粒表达的蛋白

如果是蛋白的话，是不是可以用聚丙烯酰胺凝胶电泳检测？
如果直接用HPLC检测，看文献一般是先用胰蛋白酶消化后定量消化得到的肽。
比如这两篇文献：http://www.tno.nl/downloads/Anal ... 0using%20LC-MS1.pdf
http://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1002/rcm.4856/pdf
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10楼2012-05-22 19:14:37
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