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游凤-shelly

金虫 (初入文坛)

[求助] 天然色素的定量方法？

已知：现欲提取食品中的的天然色素，该色素结构目前尚未得知，只能大致判断为类黄酮色素，而非花色苷类，该色素为深红，但从本人所读资料得知，类黄酮色素一般都为淡黄色？
对色素提取的uv扫描中并未得到400-750nm有波峰，但在190-400nm间，分别在230、270、370有大峰，请问现在如何对色素定量？对定量方法要求不是很严格，只要能作为提取色素工艺中作为色素衡量的一个标准即可。
本人能否随便在400-750间取个波长测其吸光度，将其大小作为衡量指标？
解答者有金币相送哦。。。

色素粗提物-提取剂：NaOH0.2mol/L
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1楼2012-05-06 16:49:44
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lxwqd

金虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
sweety: 金币+1, 鼓励新虫应助 2012-05-06 19:37:08
是否应该先跑一下薄板层析，看有哪些成分，纯度如何，在将不同斑点溶解，扫一下UV。后面应该就比较清楚了。
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游凤-shelly
要光明正大，不要搞阴谋诡计！
2楼2012-05-06 18:38:05
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游凤-shelly

金虫 (初入文坛)
送鲜花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by lxwqd at 2012-05-06 18:38:05:
是否应该先跑一下薄板层析，看有哪些成分，纯度如何，在将不同斑点溶解，扫一下UV。后面应该就比较清楚了。

谢谢 已经跑过了  我当时用的是醇提物（淡黄棕色）进行的跑板，是分析型的硅胶板， 按照黄酮分离的方法跑的
60%醇提物→减压浓缩→膏状物→80%乙醇溶解→毛细管吸取部分上清液→点板→展开剂（正丁醇：醋酸：水=5:3:2）→紫外280nm下观察→结果

我的观察发现效果不理想，后来又试着调节展开剂，将极性增大，但也没分开，由于还没有自制硅胶板，所以这方面的尝试就搁浅了
另外，枣皮色素一般文献都说用碱液提，碱液提的杂质太多 而且对色素其他方面可能造成不好的影响，我考察发现，诸多提取剂中，也只有碱液效果最显著，请问该怎么办呢？
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3楼2012-05-06 20:22:37
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gzhttao

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
植物提取物是混合物，直接打光谱没有意义。必须分离出单个物质，所以要作薄层或柱层。找出代表性的物质进行定量。“代表性物质”可能摩尔吸光系数不高（测定灵敏度低），可以考虑进行增色反应再测定
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4楼2012-05-06 21:43:57
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游凤-shelly

金虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by gzhttao at 2012-05-06 21:43:57:
植物提取物是混合物，直接打光谱没有意义。必须分离出单个物质，所以要作薄层或柱层。找出代表性的物质进行定量。“代表性物质”可能摩尔吸光系数不高（测定灵敏度低），可以考虑进行增色反应再测定

我当时参考的方法是《新疆。。。。黄酮类色素的定量方法》中的讲到的 关于如何分离黄酮类物质和杂质的方法 文献中分开了 而且也是用紫外灯照射的 所以我就照办了 但应用到我提的色素粗提液上 效果很不理想 不过还是看得到几个浅浅的点有分开的样子  
现在目前存在的关键问题是 还分不出来单个物质 我不是搞药物的 所以专业知识差了些 还想跟对方探讨下
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5楼2012-05-06 22:20:47
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yu27317961

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
将你的图谱发给挪威皇家科学院多酚实验室，请教下大牛！
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6楼2012-05-07 19:24:43
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咱家老四

木虫 (著名写手)

浊世俗人痴事妄言
产品稳定性如何？一般黄酮类色素稳定性都还可以，以某次制备的纯度相对高、均匀性好的样品为标准品，需要对比时，取少量稀释特定倍数观察对比，配合用色差计（不知道是否配备）检测一些基色指标，是否能行得通？
另外，红曲红和姜黄也属于酮类色素，可简单研究它们的检测方法，红曲红有国标，姜黄有行标，看看是否有可参考的地方。
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垂肩负手，渐行渐远
7楼2012-05-08 12:03:05
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野猪zj

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 游凤-shelly at 2012-05-06 20:22:37
谢谢 已经跑过了  我当时用的是醇提物（淡黄棕色）进行的跑板，是分析型的硅胶板， 按照黄酮分离的方法跑的
60%醇提物→减压浓缩→膏状物→80%乙醇溶解→毛细管吸取部分上清液→点板→展开剂（正丁醇：醋酸：水=5 ...

我也在做天然色素的提取，是吡啶类衍生物，也想做一下薄层，想问下这个展开剂应该怎么选？色素本来也是紫色，我们这种是不是就不用选择显色剂了？我不太懂，求指教！
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8楼2012-10-25 16:27:28
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ldmwlm

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

好像先要分离出纯品色素，再定性定量喔
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二泉滴翠
9楼2012-12-02 21:12:28
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bigboy1973

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

红颜色的天然色素并不太多

你告诉我什么植物 我就知道是什么成分了。 另外可以用400-500nm吸光度初步跟踪  通过紫外图谱看出，你这个纯度不够，色素这东西看起来颜色深，实际上东西少，所以叫色素
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I\will be back!!!
10楼2013-11-08 17:58:12
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