[求助] 高手指点一下蜗牛酶的除菌

各位高手，小弟请教一个问题啊，我们实验室买的蜗牛酶是粉末状的，配成试剂形式之后需要过滤除菌，可是用0.45μm的滤膜过滤不了，拿去4℃离心，发现其有沉淀，这是怎么回事，各位是怎么除菌的？

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1楼 2012-05-04 09:13:57

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冼亮淀粉酶

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scelab: 回帖置顶 2012-05-04 11:32:38
scelab: 金币+5, MicEPI+1, 谢谢热心交流~ :) 2012-05-04 11:32:55
qizongxian: 金币+5, ★★★很有帮助, 解答很给力！！十分感谢！~ 2012-05-04 11:51:34

粉末状的可能是有两种制备方法，一种是将酶纯化之后冻干，但涉及到酶的重组表达和分离纯化，工序较多，投入成本高，价格偏贵，而且纯酶一般是液态产品，没有必要制备成冻干粉。另一种是粗酶冻干，这样的工序少，制备成本低，但粗酶可能含有一些杂质，在冻干之前的离心过膜步骤去除不了，但冻干之后再溶解就沉淀下来了。或者粗酶在冻干之前还加了一些吸附剂来吸附，那么冻干之后再溶解产生的沉淀更多。

最直接的方法是测定溶解之后的酶活力比商品包装上写的损失了多少，但我觉得没必要，损失就损失了，测了之后也不会重新变多。而且如果是用来破壁制备原生质体的蜗牛酶没必要很纯，粗一点没关系。

有沉淀就先离心再过膜，直接过0.45微米的膜肯定堵的。

我认为有沉淀是正常的，也是可以接受的，最多也就下次买纯酶，只要有钱。

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流星来时我许了个愿，愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具，久不看论坛一来就提问者，宁弃EPI和VIP也不回帖。

3楼2012-05-04 10:55:32