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batistuta28

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助】请高手指点C18自制小柱分离方法 已有3人参与

我现在在做一个中药的指纹图谱建立工作,不过柱子的话会在前8分钟有许多的杂峰,用了大孔吸附树脂希望除杂质,但是又遇到了死吸附过多,目标物质损失太多的情况,所以现在想用C18小柱来模拟HPLC前十分钟的过程来洗脱杂质,现在遇到困难,请高手指教:
       我是梯度洗脱,应该如何选择洗杂质的溶剂呢??用初始值还是8分钟时的比例还是用中间比例???还有就是我的用量该怎么确定??是与液相用的量相同(1ml/min*10ml)??还是需要加大几倍量呢??这柱子速度好慢啊!

[ Last edited by xiaodu2007693 on 2010-5-14 at 10:48 ]
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皇阿玛

铁杆木虫 (著名写手)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
karl2100(金币+1):多谢指教! 2010-05-14 13:02:57
不过柱子的话会在前8分钟有许多的杂峰
在计算相似度时可以从8分钟开始啊
我是梯度洗脱,应该如何选择洗杂质的溶剂呢??
甲醇-水,乙腈-水系统,参考HPLC流动性,可能还是要摸索一下。
2楼2010-05-14 11:52:52
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woshijj

银虫 (初入文坛)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
建议用8分钟时的比例会好些!
3楼2010-05-14 12:09:40
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batistuta28

金虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by 皇阿玛 at 2010-05-14 11:52:52:
不过柱子的话会在前8分钟有许多的杂峰
在计算相似度时可以从8分钟开始啊
我是梯度洗脱,应该如何选择洗杂质的溶剂呢??
甲醇-水,乙腈-水系统,参考HPLC流动性,可能还是要摸索一下。

多谢指点
4楼2010-05-14 14:25:40
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batistuta28

金虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by woshijj at 2010-05-14 12:09:40:
建议用8分钟时的比例会好些!

好的,我试试看,多谢。
5楼2010-05-14 14:26:12
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