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saliangqh

新虫 (正式写手)

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[交流] DNA电泳

跑DNA电泳的亲们交流一下DNA电泳吧谢谢了

这是我跑的电泳
用CTAB法提取
将样品加20μl SDS和1ml预热的CTAB提取液，在65℃下水浴1h，其每间隔5min轻轻摇晃，加入等体积的苯酚：氯仿：异戊醇=25:24:1，在漩涡混合器上震荡混匀，10000r4℃离心10min，取上清加1ml冷冻的无水乙醇和50μl乙酸钠（3M PH=5）-20℃冷冻1h，10000r4℃离心10min，用70%无水乙醇洗涤2次，干燥后加TE溶解，-20℃保存备用。
0.8%琼脂糖电泳染色10min 凝胶成像
出来的图像是这样的想请大家帮分析一下谢谢

[ Last edited by saliangqh on 2012-5-2 at 17:11 ]

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1楼 2012-05-01 21:07:56

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longrna

新虫 (正式写手)

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★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-05-07 13:38:44

胶配的不怎么样，marker跑成那样。
描述的提取步骤太模糊了，什么样品、裂解液浓度、操作动作、上清体积、加乙醇体积、电泳条件等等都没说清楚。
如果是基因组DNA，建议使用lambdaDNA/HindIII maker。
如果是提基因组DNA，提的不怎么样：有些没提出来，有些降解，有些有很严重的RNA污染。