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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » PCR克隆cDNA
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lhl2225

金虫 (正式写手)

[资源] PCR克隆cDNA


最近一直在做cDNA克隆，连T vector测序，总结了一点经验说给大家！
1.小于1kb序列，可直接用普通Taq enzyme扩增连T vector测序，99%无碱基突变，如有突变，纯属偶然！
2.大于1kb序列，需要用1/2Taq enzyme+1/Pfu enzyme(高保真酶），另加1/2Taq buffer+1/Pfu buffer，其余组分同普通pcr体系添加即可，扩增产物直接连接T vector测序，不用再另外+A，因为Taq enzyme自动在3‘段加A。
不明白的可以e-mail 我
lhl2225@yahoo.com.cn
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1楼 2007-04-10 13:55:09
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lhl2225

金虫 (正式写手)
克隆基因编码序列
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3楼2007-04-10 17:08:40
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幻影无痕

荣誉版主 (知名作家)
呵呵！克隆什么啊？
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2楼2007-04-10 15:43:54
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