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PCR克隆cDNA
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 最近一直在做cDNA克隆，连T vector测序，总结了一点经验说给大家！ 1.小于1kb序列，可直接用普通Taq enzyme扩增连T vector测序，99%无碱基突变，如有突变，纯属偶然！ 2.大于1kb序列，需要用1/2Taq enzyme+1/Pfu enzyme(高保真酶），另加1/2Taq buffer+1/Pfu buffer，其余组分同普通pcr体系添加即可，扩增产物直接连接T vector测序，不用再另外+A，因为Taq enzyme自动在3‘段加A。 不明白的可以e-mail 我 lhl2225@yahoo.com.cn |
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2楼2007-04-10 15:43:54
3楼2007-04-10 17:08:40