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wlqsky

铜虫 (初入文坛)

[求助] 求助southern杂交的问题，相信很多人都碰到的问题

最近做southern杂交，PCR产物可以杂交出来，但是目的基因组和酶切后的基因组都杂交不出来，DNA的量都上到100ug还是不行。最近一次杂交，琼脂糖胶电泳完毕后，在紫外下观察（胶事先加了gel red），条带非常亮！但是变性液和中和液处理以后，条带就非常模糊看不清了。在转膜后，烘干过程中，我在膜上直接点了1ul基因组变性，冰浴处理后的基因组。在曝光后竟然可以杂交出来。困惑的是，中和液和变性液处理能使DNA损失吗？有人做个过变性胶电泳热变性、冰浴处理的DNA，然后直接进行转膜的southern杂交，结果如何呢？
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1楼 2012-04-30 15:14:46
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1325128

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
amisking: 金币+2, 鼓励发帖交流问题。 2012-04-30 16:56:12
因为PCR产物的组分相对较为复杂建议你调整一下你的探针再试试，我估计你的探针砸的不好。
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2楼2012-04-30 16:06:04
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