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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 求助实时荧光PCR
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adili

铁虫 (初入文坛)

[交流] 求助实时荧光PCR

哪位好心人帮我一下吧！真的是太迷茫了！我准备做实时荧光PCR，可问题是我做的这一物种是一个新物种，前人没做过，只做过同一个科的实时荧光PCR！我根据文献用这一个科的mtDNACOI基因的通用引物对我的这一物种进行普通PCR，并克隆之后测了序，我本想在这一片段中寻找一对特异性引物探针做实时荧光PCR，可是这一mtDNACOI基因片段与同一科的另一个种相似性高达94.6%，以至于设计特异性引物十分困难，我该怎么办？选取cytb,its做一做呢？还是该怎么做？帮帮我！谢谢了
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1楼 2012-04-29 23:31:18
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adili

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by rb at 2012-04-30 08:15:14:
很简单呀，相似性94.6%，可以采用锁核苷酸探针针对不一致序列进行定量PCR。

这位大侠你好！能否麻烦您帮着详细解释一下！谢谢了！我根据这一mtDNACOI基因片段设计了引物探针可特异性实在是不好。。。
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3楼2012-04-30 10:16:20
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rb

木虫 (著名写手)
★ ★ ★
adili(金币+1): 谢谢参与
zhaohq1209: 金币+2, 鼓励交流~ 2012-04-30 15:00:12
很简单呀，相似性94.6%，可以采用锁核苷酸探针针对不一致序列进行定量PCR。
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2楼2012-04-30 08:15:14
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rb

木虫 (著名写手)
锁核苷酸技术哪怕只是1个碱基差异都能区分，这个事罗氏的技术。你是哪里人？如果你是上海的，我可以推荐一个人，你直接和他联系。
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4楼2012-04-30 14:13:33
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adili

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by rb at 2012-04-30 14:13:33:
锁核苷酸技术哪怕只是1个碱基差异都能区分，这个事罗氏的技术。你是哪里人？如果你是上海的，我可以推荐一个人，你直接和他联系。

真好！谢谢你！我是新疆的，，，
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5楼2012-04-30 15:03:01
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