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adili

铁虫 (初入文坛)


[交流] 求助实时荧光PCR

哪位好心人帮我一下吧!真的是太迷茫了!我准备做实时荧光PCR,可问题是我做的这一物种是一个新物种,前人没做过,只做过同一个科的实时荧光PCR!我根据文献用这一个科的mtDNACOI基因的通用引物对我的这一物种进行普通PCR,并克隆之后测了序,我本想在这一片段中寻找一对特异性引物探针做实时荧光PCR,可是这一mtDNACOI基因片段与同一科的另一个种相似性高达94.6%,以至于设计特异性引物十分困难,我该怎么办?选取cytb,its做一做呢?还是该怎么做?帮帮我!谢谢了
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adili

铁虫 (初入文坛)


引用回帖:
2楼: Originally posted by rb at 2012-04-30 08:15:14:
很简单呀,相似性94.6%,可以采用锁核苷酸探针针对不一致序列进行定量PCR。

这位大侠你好!能否麻烦您帮着详细解释一下!谢谢了!我根据这一mtDNACOI基因片段设计了引物探针可特异性实在是不好。。。
3楼2012-04-30 10:16:20
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rb

木虫 (著名写手)


★ ★ ★
adili(金币+1): 谢谢参与
zhaohq1209: 金币+2, 鼓励交流~ 2012-04-30 15:00:12
很简单呀,相似性94.6%,可以采用锁核苷酸探针针对不一致序列进行定量PCR。
2楼2012-04-30 08:15:14
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rb

木虫 (著名写手)


锁核苷酸技术哪怕只是1个碱基差异都能区分,这个事罗氏的技术。你是哪里人?如果你是上海的,我可以推荐一个人,你直接和他联系。
4楼2012-04-30 14:13:33
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adili

铁虫 (初入文坛)


引用回帖:
4楼: Originally posted by rb at 2012-04-30 14:13:33:
锁核苷酸技术哪怕只是1个碱基差异都能区分,这个事罗氏的技术。你是哪里人?如果你是上海的,我可以推荐一个人,你直接和他联系。

真好!谢谢你!我是新疆的,,,
5楼2012-04-30 15:03:01
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