应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 提取RNA电泳上样量
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
222/3返回列表上一页123下一页
查看: 5592  |  回复: 21
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

wushuwei1104

银虫 (小有名气)
引用回帖:
10楼: Originally posted by wushuwei1104 at 2012-05-05 09:53:31:
1,动物组织的话，大概0.1克就可以，加入TRAZOL 1毫升即可，建议用匀浆器研磨。
2，脂肪、肝脏的话操作时没有什么特殊要求（尽量别取脂肪），或是取脂肪少的部位提取RNA。
3、TRIZOL的话如果没有污染，放在4℃条 ...

补一句：操作过程尽量严格，避免灰尘接触，戴口罩，勤换手套。低温操作（冰盒），尽量严格吧！！！
赞一下 回复此楼
勤能补拙
11楼2012-05-05 09:59:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

桐苇铅铅

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
10楼: Originally posted by wushuwei1104 at 2012-05-05 09:53:31:
1,动物组织的话，大概0.1克就可以，加入TRAZOL 1毫升即可，建议用匀浆器研磨。
2，脂肪、肝脏的话操作时没有什么特殊要求（尽量别取脂肪），或是取脂肪少的部位提取RNA。
3、TRIZOL的话如果没有污染，放在4℃条 ...

是的，谢谢啦，我做的实验是先提取垂体的RNA,再反转录，然后做RACE,克隆生长激素CDNA全长，其他14个组织的RNA是用作定量用的，还有一部分是克隆内含子的，不知道做这么多，能不能毕业啊，觉得有点少，可是又不知道还能做些什么，就是这些实验，还不知道什么时候能做完呢。。。。
赞一下 回复此楼
12楼2012-05-05 14:26:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wushuwei1104

银虫 (小有名气)
引用回帖:
12楼: Originally posted by 桐苇铅铅 at 2012-05-05 14:26:25:
是的，谢谢啦，我做的实验是先提取垂体的RNA,再反转录，然后做RACE,克隆生长激素CDNA全长，其他14个组织的RNA是用作定量用的，还有一部分是克隆内含子的，不知道做这么多，能不能毕业啊，觉得有点少，可是又不知 ...

哥们儿，咱们真有缘！！我是提取植物的RNA，然后在反转录，做RACE，克隆一个基因的全长基因，构建原核表达载体，最后在表达！！  
加油吧小伙儿，RACE可不太好做，我这正做着呢，已经2个月了，没出啥东西。   加油吧！！！！好运-----
赞一下 回复此楼
勤能补拙
13楼2012-05-05 17:33:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

桐苇铅铅

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
10楼: Originally posted by wushuwei1104 at 2012-05-05 09:53:31:
1,动物组织的话，大概0.1克就可以，加入TRAZOL 1毫升即可，建议用匀浆器研磨。
2，脂肪、肝脏的话操作时没有什么特殊要求（尽量别取脂肪），或是取脂肪少的部位提取RNA。
3、TRIZOL的话如果没有污染，放在4℃条 ...

0.1克是多少啊，是绿豆那么大吗，为什么我提的RNA总降解呢，降解主要是剪组织和匀浆注意好了就行吗，电泳时电压多少合适啊，有没有提RNA的详细操作步骤呢，求步骤啊，
赞一下 回复此楼
14楼2012-05-07 09:45:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wushuwei1104

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流，多多应助 2012-05-08 13:34:05
引用回帖:
14楼: Originally posted by 桐苇铅铅 at 2012-05-07 09:45:18:
0.1克是多少啊，是绿豆那么大吗，为什么我提的RNA总降解呢，降解主要是剪组织和匀浆注意好了就行吗，电泳时电压多少合适啊，有没有提RNA的详细操作步骤呢，求步骤啊，

差不多跟绿豆粒大小，提RNA时一定要注意。环境洁净很重要，提取要戴口罩，勤换手套。电泳120V,20分钟即可。
步骤：1、1毫升TRIZOL研磨充分组织后倒入处理过的1.5毫升离心管，加入200微升氯仿，12000g离心15分钟。
2、吸取上清液（约500微升）加入等体积（500微升）异丙醇，室温静置2-3分钟，12000g离心10分钟。
3、弃上清，加入1毫升DEPC处理过的水配置的75%乙醇，振荡混匀，7500g离心5分钟。
4、弃上清（尽量把液体弃净，室温挥发2-3分钟至离心管中没有明显液体残留）
5、加入20-30微升DEPC处理过的水，溶解RNA，立即放入-80℃冰箱储藏。

加油，RNA一般很好提取！  祝君好运！
赞一下 回复此楼
勤能补拙
15楼2012-05-07 18:08:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yiyi12

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+1, 鼓励交流 2012-05-08 13:34:17
我们标准用都是用6Xbuffer：RNA=1:3.不过不一定。我用buffer都是随机点一个个小点，RNA用2ul。
赞一下 回复此楼
16楼2012-05-07 20:45:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

桐苇铅铅

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
13楼: Originally posted by wushuwei1104 at 2012-05-05 17:33:30:
哥们儿，咱们真有缘！！我是提取植物的RNA，然后在反转录，做RACE，克隆一个基因的全长基因，构建原核表达载体，最后在表达！！  
加油吧小伙儿，RACE可不太好做，我这正做着呢，已经2个月了，没出啥东西。   加 ...

RACE很难做的吗，我还没有做到呢，现在RNA还没提好呢，着急啊，现在在做RT PCR,引物还没设计好，郁闷，真不是学生物的料。。。。。。
赞一下 回复此楼
17楼2012-05-08 19:21:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wushuwei1104

银虫 (小有名气)
引用回帖:
17楼: Originally posted by 桐苇铅铅 at 2012-05-08 19:21:45:
RACE很难做的吗，我还没有做到呢，现在RNA还没提好呢，着急啊，现在在做RT PCR,引物还没设计好，郁闷，真不是学生物的料。。。。。。

加油，我都快毕业了，还没出东西！！  急呀！！一起加油！
赞一下 回复此楼
勤能补拙
18楼2012-05-08 20:48:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yufangcui

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 桐苇铅铅 at 2012-05-04 12:45:06
谢谢，buffer是不是要多加点啊...

请问我提的浓度为233ng/ul，跑的时候要加多少的量呢？谢谢
赞一下 回复此楼
19楼2012-12-03 23:13:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

疯子J-F

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

其实提好RNA后，没必要跑胶检测，本来含量就少，可以直接批，用rt-pcr的产物跑胶，当然这对于rna提的较熟练者是比较合适的，毕竟反转录试剂盒不便宜，希望有所帮助……
赞一下 回复此楼
20楼2013-07-22 22:28:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 桐苇铅铅 的主题更新
222/3返回列表上一页123下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 工科277分求调剂材料 +7 上了上了上哦 2026-04-05 8/400 2026-04-05 11:47 by 上了上了上哦
[考研] 0832食品科学与工程学硕282调剂 +6 鱼在水中游a 2026-04-02 9/450 2026-04-05 11:45 by flysky1234
[考研] 0703化学调剂325分 +9 15771691647 2026-04-04 9/450 2026-04-05 11:39 by 猪会飞
[考研] 材料工程专硕求调剂 +11 hyl3153942 2026-03-29 11/550 2026-04-05 11:12 by 风雨无晴
[考研] 284求调剂 +6 徐同学_001 2026-04-04 6/300 2026-04-05 09:16 by rzh123456
[考研] 22408求调剂 354分 可跨专业 +3 hannnnnnn 2026-04-04 3/150 2026-04-04 14:35 by 土木硕士招生
[考研] 考研调剂 +3 15615482637 2026-04-03 3/150 2026-04-03 22:50 by ms629
[考研] 343求调剂085601 +6 要努力学习x 2026-03-29 7/350 2026-04-03 19:49 by 百灵童888
[考研] 0856，269分求调剂 +15 有学上就行求求� 2026-03-30 18/900 2026-04-03 16:50 by melodiousnow
[考研] 282求调剂 +5 呼吸都是减肥 2026-03-31 5/250 2026-04-03 12:03 by 1753564080
[考研] 285求调剂 +7 AZMK 2026-04-02 9/450 2026-04-03 11:12 by wanwan00
[考研] 326求调剂 +3 9ahye 2026-04-02 4/200 2026-04-03 08:43 by Jaylen.
[考研] 0856材料与化工调剂，339 +14 10213207 2026-03-31 14/700 2026-04-02 21:01 by 1104338198
[考研] 321求调剂 一志愿 浙江工业大学生物医药 +5 嘿嘿HC 2026-04-01 6/300 2026-04-02 15:23 by sophie2180
[考研] 07生物学求调剂 一志愿同济大学359分 +3 LAMC. 2026-03-30 3/150 2026-04-02 10:26 by 18828373951
[考研] 337求调剂 +11 《树》 2026-03-29 11/550 2026-04-02 10:20 by 不吃魚的貓
[考研] 290求调剂 +5 dfffsar 2026-03-29 5/250 2026-04-01 19:45 by 6781022
[考研] 311求调剂 +10 李芷新1 2026-03-31 10/500 2026-04-01 14:38 by chenqifeng666
[考研] 一志愿北交材料工程总分358 +5 cs0106 2026-04-01 7/350 2026-04-01 11:45 by wangjy2002
[考研] 085602 化学工程专硕 340分求调剂 +4 qianbai11 2026-03-29 4/200 2026-03-30 11:34 by 唐沐儿
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭