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alqfren

木虫 (正式写手)

研究僧

[交流] 不同类别的蛋白酶的活力测定 已有8人参与

根据GB23527-2009蛋白酶制剂方法,测定方法中蛋白酶缓冲液分为三种磷酸、乳酸、硼酸,pH分别为7.5、10.5、3.0,分别用于稀释中性、碱性、酸性蛋白酶。
问题是,如果这几个pH都不是酶活的最适pH,同一温度条件40℃下不同酶之间测出来的活力有可比性吗?
比如两种蛋白酶的活力都是20万,那如果取相同单位的酶同一条件下水解蛋白,结果会一样吗?
我觉得国标测定酶活的方法,只适合同一种酶的测定,不一样的酶是没有可比性的。
所以,诺维信等厂家才会用自己测定酶活的方法和不同酶活单位来标注不同的酶,对不对?

那我现在比较几种蛋白酶的酶解效果,按照统一的酶活力单位来添加的话,是不是根本没有意义?
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研究僧
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sunnymen

银虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
9楼: Originally posted by meiting at 2012-05-12 13:01:43
比较几种蛋白酶的活力,没必要一定用国标,自己制定一个比较适合你实验方法的酶活力标准就行了,这样操作更为简单。

请问你自定的方法是什么?
10楼2012-09-12 17:20:36
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biolio2009

木虫 (著名写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
你做酶解  主要看的是水解后的结果 ,更本不用在意 厂家产品酶活力标注
这个只是一个参考。
2楼2012-04-25 10:54:31
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alqfren

木虫 (正式写手)

研究僧

引用回帖:
2楼: Originally posted by biolio2009 at 2012-04-25 10:54:31:
你做酶解  主要看的是水解后的结果 ,更本不用在意 厂家产品酶活力标注
这个只是一个参考。

那我现在比较几种蛋白酶的酶解效果,按照统一的酶活力单位来添加的话,是不是根本没有意义?
研究僧
3楼2012-04-25 11:10:04
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zxc6884

铁杆木虫 (著名写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
活性测定是有前提条件的(指定底物\pH\温度\缓冲体系),你使用的条件可能不完全一样,可以按照说明书给的活性前后做个梯度。
关注我关注的
4楼2012-04-25 19:50:41
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