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fanxiaojuan金虫 (小有名气)
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测酶活中的缓冲液怎么配制
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| 0.1mol/LPh=4.8醋酸缓冲液，250mmol/LPH=3.0和50mmol/LPH=4.5的酒石酸溶液怎么配制？ |
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 【分子生物】EPI帖 | 某事 |
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250mmol/LPH=3.0和50mmol/LPH=4.5的酒石酸溶液怎么配制？ 回答： 酒石酸是二元酸，但是解离时基本上只考虑一级解离即可，也是用Henderson-Hasselbalch方程， 1）PH=3的250mmol/L的酒石酸缓冲溶液的配制方法： d-酒石酸，pKa1=3.04；pKa2=4.37. pH=pKa1+lg[C(HA-)/C(H2A)] 3=3.04+lg[C(HA-)/C(H2A)] lg[C(HA-)/C(H2A)]=-0.04 [C(H2A)/C(HA-)]=10^(0.04)=1.0964， 这也就是说只要是同样摩尔浓度的酒石酸溶液和酒石酸钠溶液 按等体积混溶就成为PH=3，你既然要250mmol/L的酒石酸缓冲溶液，那就先配出250mmol/L的酒石酸溶液和250mmol/L的酒石酸钠溶液等体积混溶均匀即可成为PH=3的250mmol/L的酒石酸缓冲溶液。明白了吗？ 2）250mmol/L的PH=4.5的酒石酸缓冲溶液的配制方法： pH=pKa1+lg[C(HA-)/C(H2A)] 4.5=3.04+lg[C(HA-)/C(H2A)] lg[C(HA-)/C(H2A)]=1.46 [C(HA-)/C(H2A)]=28.8403 也就是[C(HA-)/C(H2A)]=29/1，即配制时取【酒石酸钠的物质的量(摩尔数)】/【 酒石酸的物质的量(摩尔数)】=29/1.看懂了吗？ |
9楼2012-04-23 23:39:47
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我把过程给你整个讲一遍，下次你自己就会算了。 醋酸缓冲溶液的配法 公式pH=pKa+lg([AC-]/[HAC]) =4.8 HAC的pKa=4.75 代入得[AC-]/[HAC]=10^(0.05)=1.20 所以只要醋酸钠和醋酸的物质的量之比为1.20，即可。醋酸根（包括解离和未解离的）的总摩尔浓度0.1mol/L，其中[AC-]占0.1mol/L的54%，[HAC]占0.1mol/L的46%。 如果要配100mL的醋酸缓冲溶液，则需要NaAc(3H2O) 0.1X54%X0.1mol, 即0.0054mol，需要冰醋酸0.1X46%X0.1mol, 即0.0046mol， 事先配好1 mol/L 的NaAc(3H2O)溶液和1 mol/L的 HAc溶液（由冰醋酸加蒸馏水配成），则取 1 mol/L NaAc 溶液5.4(mL)，0.0054 mol， 1 mol/L HAc 溶液4.6 (mL)，0.0046mol， 一起混匀，然后加蒸馏水稀释到100mL. （NaAc•3H2O分子量＝136.09） |
4楼2012-04-22 23:43:16