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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 测酶活中的缓冲液怎么配制
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fanxiaojuan

金虫 (小有名气)

[求助] 测酶活中的缓冲液怎么配制

0.1mol/LPh=4.8醋酸缓冲液，250mmol/LPH=3.0和50mmol/LPH=4.5的酒石酸溶液怎么配制？
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1楼 2012-04-22 21:22:11
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凌波丽

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★
西瓜: 金币+2, 鼓励交流 2012-04-23 22:03:42
酒石酸是二元酸，但是解离时基本上只考虑一级解离即可，也是用Henderson-Hasselbalch方程，就是我上面用的方程，这个贴你可以参考：
http://muchong.com/html/200807/900807.html。

在想具体些，可以看：I.H.Segel 编，吴经才、张光兴、静天玉 等 译，生物化学计算，科学出版社，1983，第27-52页。我有该书的英文版电子版，LZ需要，我改日发上来。
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5楼2012-04-23 00:20:38
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fanglove0o0

金虫 (小有名气)
是做酶活力的吗？交流交流啊
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2楼2012-04-22 21:26:29
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fanxiaojuan

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by fanglove0o0 at 2012-04-22 21:26:29:
是做酶活力的吗？交流交流啊

是测酶活啊，你测得什么酶？
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3楼2012-04-22 21:33:02
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凌波丽

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
fanxiaojuan: 金币+6, ★★★很有帮助, 很详细，非常感谢 2012-04-23 08:42:21
小丹木木: 金币+3, MolEPI+1, good 2012-04-23 10:32:56
我把过程给你整个讲一遍，下次你自己就会算了。

醋酸缓冲溶液的配法
公式pH=pKa+lg([AC-]/[HAC]) =4.8
HAC的pKa=4.75
代入得[AC-]/[HAC]=10^(0.05)=1.20
所以只要醋酸钠和醋酸的物质的量之比为1.20，即可。醋酸根（包括解离和未解离的）的总摩尔浓度0.1mol/L，其中[AC-]占0.1mol/L的54%，[HAC]占0.1mol/L的46%。
如果要配100mL的醋酸缓冲溶液，则需要NaAc(3H2O)  0.1X54%X0.1mol, 即0.0054mol，需要冰醋酸0.1X46%X0.1mol, 即0.0046mol，
事先配好1 mol/L 的NaAc(3H2O)溶液和1 mol/L的 HAc溶液（由冰醋酸加蒸馏水配成），则取
1 mol/L  NaAc  溶液5.4(mL)，0.0054 mol，
1 mol/L  HAc  溶液4.6 (mL)，0.0046mol，
一起混匀，然后加蒸馏水稀释到100mL.
（NaAc•3H2O分子量＝136.09）
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4楼2012-04-22 23:43:16
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