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w.king124

金虫 (正式写手)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
50楼: Originally posted by atlanticwi at 2012-05-07 14:59:45:
麻烦请问 您那是否有这几个仪器的相关的资料呢?

我这边手里倒是有一些资料,480的使用手册有的,RGQ的也有,ABI系列的不全,可以一起交流一下…………另外高手那真是谈不上,只是最近才学了点仪器的知识,互相学习
51楼2012-05-07 20:10:30
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sajapple

新虫 (初入文坛)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
请问一下你的问题最终是怎么解决的呢,我现在也出现类似的问题了,我用的是染料法,同样条件,普通pcr上有扩增,做Qpcr无扩增曲线,产物电泳也无产物。
52楼2013-05-09 19:29:28
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sugarzZ

新虫 (初入文坛)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
52楼: Originally posted by sajapple at 2013-05-09 19:29:28
请问一下你的问题最终是怎么解决的呢,我现在也出现类似的问题了,我用的是染料法,同样条件,普通pcr上有扩增,做Qpcr无扩增曲线,产物电泳也无产物。

做QPCR的Master Mix 有没有问题,或者QPCR机器和程序有什么问题……
你可以试试用普通PCR的Master Mix在QPCR仪上跑个QPCR程序试试,不用收集荧光信号。
53楼2013-07-09 09:16:46
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w.king124

金虫 (正式写手)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
41楼: Originally posted by atlanticwi at 2012-05-06 23:48:11
嗯......................
       我用过TOYOBO和Invitrogen公司两种Mix 均是直接加入的,TOYOBO产品没有直接注明 Invitrogen公司会写含ROX的XXXXX让人一目了然,并非是ABI的用而其他仪器不用,据我所知大多数仪器 ...

伯乐、凯杰、罗氏的仪器都无需Rox校正的,和检测器的类型、检测原理相关,而非不支持ROX,激发和检测ROX的滤光片都有的,要检测也是可以的
54楼2013-07-09 13:18:32
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小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
首先ABI的机器推荐你用TAKARA公司的Mix,我们做过对比试验,这个mix可以说是目前世界上最好的mix之一,使用20ul反应体系即可。还有7500机器延伸时间最好不要低于30s,因为机器在这一步收集荧光信号,时间太短的话你自己应该也能想明白为什么不好。强烈要求你把反应体系中共同的成分配制成mix,然后统一分装到8连管或者96孔板内,这样可以最大限度的减少实验误差。最后一点,上机前一定要短暂离心。
55楼2013-07-09 14:44:27
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jl.liu

新虫 (初入文坛)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
机器问题,或引物不行,看图是有扩增的,但效率太低了
56楼2015-09-03 16:28:46
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