24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 17476  |  回复: 55
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

可帅儿

银虫 (正式写手)


[交流] 扩增曲线不平滑是怎么回事?

我又来了。。。
今天又做了一批荧光PCR,最后的结果是大致的曲线走向都对的,就是有个问题曲线不够平滑。图在下面。以前做了几次也有这个问题呢~请问这会是什么原因?
P.S.我用的是ABI7500做的,想同时做出扩增曲线和溶解曲线,请问有木有熟悉仪器的大虾,应该怎么setup才行呢?貌似实验type只能是一种。。。
配工作液还不太熟练,我怕配错;于是想一管一管加,这样至少不会有差错。










这是4个重复的反应,用的是50ul体系












这也是4个重复的,但是100ul体系,貌似效果比50 的好



[ Last edited by 可帅儿 on 2012-4-19 at 13:42 ]
回复此楼

» 猜你喜欢

» 抢金币啦!回帖就可以得到:

查看全部散金贴

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sugarzZ

新虫 (初入文坛)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
52楼: Originally posted by sajapple at 2013-05-09 19:29:28
请问一下你的问题最终是怎么解决的呢,我现在也出现类似的问题了,我用的是染料法,同样条件,普通pcr上有扩增,做Qpcr无扩增曲线,产物电泳也无产物。

做QPCR的Master Mix 有没有问题,或者QPCR机器和程序有什么问题……
你可以试试用普通PCR的Master Mix在QPCR仪上跑个QPCR程序试试,不用收集荧光信号。
53楼2013-07-09 09:16:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 56 个回答

可帅儿

银虫 (正式写手)


哎~~自己来顶顶!求大神指点(⊙o⊙)哦
2楼2012-04-19 13:44:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chlorella409

木虫 (正式写手)


★ ★ ★ ★ ★
可帅儿(金币+1): 谢谢参与
西瓜: 金币+4, Good! 2012-04-19 17:27:17
首先我认为扩增曲线不光滑可能时因为还在基线期,其次,你要加溶解曲线的话可以在experiment menu的experiment properties里面选择检测试剂SYBRgreen下面就可以看到include melt curve在前面小框里打钩,第三,工作液可以先mix再分到每个孔里,cDNA最后加

[ Last edited by chlorella409 on 2012-4-19 at 15:55 ]
3楼2012-04-19 15:53:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

atlanticwi

金虫 (正式写手)


★ ★ ★
可帅儿(金币+1): 谢谢参与
西瓜: 金币+2, Good! 2012-04-19 17:26:48
嗯...........
感觉体系过大了哦,100uL体系完全没有必要的,同时你用的什么MasterMix呢,还有感觉前面几个图不是不平滑,而是没有起峰呢

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

4楼2012-04-19 16:19:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 283求调剂(080500) +4 A child 2026-03-27 4/200 2026-03-27 15:34 by XPU李庆
[考研] 0703化学求调剂,各位老师看看我!!! +4 祁祺祺 2026-03-25 4/200 2026-03-27 13:55 by stillstella
[考研] 22408 359分调剂 +3 Qshers 2026-03-27 3/150 2026-03-27 12:22 by wxiongid
[考研] 考研292求调剂 +3 YIXIAO789 2026-03-26 3/150 2026-03-27 10:51 by guoweigw
[考研] 286求调剂 +4 lim0922 2026-03-26 4/200 2026-03-27 10:28 by guoweigw
[考研] 生物学学硕,一志愿湖南大学,初试成绩338 +4 YYYYYNNNNN 2026-03-26 4/200 2026-03-26 19:00 by macy2011
[考研] 一志愿211 初试270分 求调剂 +6 谷雨上岸 2026-03-23 7/350 2026-03-26 18:55 by 不吃魚的貓
[考研] 一志愿北京化工大学材料与化工(085600)296求调剂 +9 稻妻小编 2026-03-26 9/450 2026-03-26 16:16 by 不吃魚的貓
[考研] 化学调剂一志愿上海交通大学336分-本科上海211 +4 小鱼爱有机 2026-03-25 4/200 2026-03-26 10:19 by aa331100
[考研] 调剂310 +3 温柔的晚安 2026-03-25 4/200 2026-03-25 23:16 by peike
[考研] 299求调剂 +7 某某某某位 2026-03-21 8/400 2026-03-25 20:34 by 热情沙漠
[考研] 网络空间安全0839招调剂 +4 w320357296 2026-03-25 6/300 2026-03-25 17:59 by 255671
[考研] 求b区院校调剂 +4 周56 2026-03-24 5/250 2026-03-25 17:12 by yishunmin
[考研] 284求调剂 +15 Zhao anqi 2026-03-22 15/750 2026-03-25 12:51 by wht0531
[考研] 340求调剂 +5 话梅糖111 2026-03-24 5/250 2026-03-25 06:53 by ilovexiaobin
[考研] 080500求调剂 +3 zzzzfan 2026-03-24 3/150 2026-03-24 16:38 by barlinike
[考研] 求调剂一志愿武汉理工大学材料工程(085601) +5 WW.' 2026-03-23 7/350 2026-03-24 14:50 by sprinining
[考研] 336化工调剂 +4 王大坦1 2026-03-23 5/250 2026-03-23 18:32 by allen-yin
[考研] 一志愿重庆大学085700资源与环境总分308求调剂 +7 墨墨漠 2026-03-20 7/350 2026-03-21 16:36 by barlinike
[考研] 330求调剂0854 +3 assdll 2026-03-21 3/150 2026-03-21 13:01 by 搏击518
信息提示
请填处理意见