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PMD19-T载体连接不上428bp的片段
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| 使用TAKARA的PMD19-T载体，连接428bp大小的片段。用的感受态是DH5α。体系是solution1 5微升，19-T 1微升，片段浓度16ng/ul，用4ul。反应时间是16℃下2小时。片段是KOD酶扩出来的，切胶回收后又用Tag酶加A，再切胶回收后用于连接的。 感受态活力良好，为什么涂板之后菌落特别少，就算有也是蓝斑多。挑过几个白斑，用M13引物扩，显示没有连上。为什么啊？ |
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送鲜花一朵 13楼2012-04-18 19:12:08
zhaohq1209
铁杆木虫 (著名写手)
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4楼2012-04-17 10:36:40