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sunwei57

木虫 (小有名气)

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感谢参与，应助指数 +1

连接428bp大小的片段不用高保真的酶,随便一个酶就可以,使用TAKARA的PMD19-T载体稀释10倍取1微升,片断4微升反应时间是16℃过夜

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630384464

11楼2012-04-18 09:44:26

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gjs713

至尊木虫 (职业作家)

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【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1

片段浓度太低吧
还有T载体加的太多，像你这里加0.1的T载就够

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勤奋、执着、专注，则无坚不破。

12楼2012-04-18 10:52:15

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新虫 (初入文坛)

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送鲜花一朵

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11楼: Originally posted by sunwei57 at 2012-04-18 09:44:26:
连接428bp大小的片段不用高保真的酶,随便一个酶就可以,使用TAKARA的PMD19-T载体稀释10倍取1微升,片断4微升反应时间是16℃过夜

好的。我去试试看。

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13楼2012-04-18 19:12:08

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新虫 (初入文坛)

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12楼: Originally posted by gjs713 at 2012-04-18 10:52:15:
片段浓度太低吧
还有T载体加的太多，像你这里加0.1的T载就够

恩。我会去试试看的。

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14楼2012-04-18 19:12:30

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新虫 (初入文坛)

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10楼: Originally posted by honinglee at 2012-04-17 16:58:40:
对还纠结于T-载连接这种小问题的童鞋我深表同情，曾经的我浪费了大量的时间在载体构建上，现在想想这些逝去的时间都痛心，几年过去了，现在好多带致死基因的PCR克隆载体十分好用，别再用那些蓝白筛选的载体了，耗 ...

哎。。。老师为了节约成本。感受态也是自制的。。。以后工作了可能好点。

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15楼2012-04-18 19:15:53

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