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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » PMD19-T载体连接不上428bp的片段
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小虫子666

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

428bp的片段还用KOD扩增？ 一般保真性好的都可以 用普通的rtaq突变的几率都不大， 为什么还要用不能加A的酶？给自己增加麻烦？ pmD19-T连接的效率很高的，我一直用这个载体。我的平板只加抗性，因为+xgal和IPTG的时候我没发现过篮斑。428bp的片段20分钟足够了，连2h做什么?  说明书上也没说用solution1 连2h呀？ 当然你不用solution1 用t4 ligase 16度 连2h是可以的. 请注意看说明书，solution1和ligase 不是一个东西。
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21楼2013-05-20 10:14:49
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