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汕头大学海洋科学接受调剂
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wansanlian

金虫 (小有名气)

[交流] 关于测蛋白核酸时的OD值:OD230,OD260,OD280

在测核酸时的时候测OD值和测蛋白的OD值分别表示什么?比如在测核酸时OD230/OD260和OD260/280,这个OD260知道是表示核酸的浓度,OD260/280是表示纯度吗?那为什么有的还说在测蛋白的时候也要测OD230,OD260,OD280呢?
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1楼 2012-04-15 23:54:52
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yyy_zzz

木虫 (小有名气)
★ ★
wansanlian(金币+1): 谢谢参与
西瓜: 金币+1, 鼓励交流 2012-04-16 21:06:06
OD260/280可以表示蛋白质污染程度，纯净的DNA好像比值在1.8往上，RNA在2.0以上，污染蛋白质的话，这个值会下降。OD230是 碳水化合物等杂质的吸收，所以，测定OD230，OD260，OD280可以检测核酸纯度（同时检验由OD260换算出的浓度是否可信）。
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2楼2012-04-16 09:03:23
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Rick001

铁杆木虫 (职业作家)
★
wansanlian(金币+1): 谢谢参与
这些值仅供参考吧。
如果PCR什么的都正常，好像没什么关系。
之前也问了不少人，
好像很关注这个的不是很多。
或许跟研究的方向也有关
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3楼2012-04-16 14:11:25
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wansanlian

金虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by Rick001 at 2012-04-16 14:11:25:
这些值仅供参考吧。
如果PCR什么的都正常，好像没什么关系。
之前也问了不少人，
好像很关注这个的不是很多。
或许跟研究的方向也有关

应该也是的,但是还是挺有用的啊,有的时候要做后续的实验的时候就要求有这些东西了啊.
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4楼2012-04-17 15:44:05
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wansanlian

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by yyy_zzz at 2012-04-16 09:03:23:
OD260/280可以表示蛋白质污染程度，纯净的DNA好像比值在1.8往上，RNA在2.0以上，污染蛋白质的话，这个值会下降。OD230是 碳水化合物等杂质的吸收，所以，测定OD230，OD260，OD280可以检测核酸纯度（同时检验由OD2 ...

是的呢.蛋白质的OD值260/280纯的话应该是在0.57左右,但是一量受到核酸的污染的话,其马上就会上升,但是如果是核酸中有蛋白的话,反倒是变的相对较少一些
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5楼2012-04-17 15:45:16
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可帅儿

银虫 (正式写手)
★
wansanlian(金币+1): 谢谢参与
DNA纯度OD260/OD280比值在1.6~1.8之间是正常的，较纯
大于1.8应该混有较多的RNA，小于1.6混有较多的蛋白质
抱歉我查资料的。
纯的蛋白质这个比值应该为0.57左右吧
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6楼2012-04-17 16:04:47
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wansanlian

金虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 可帅儿 at 2012-04-17 16:04:47:
DNA纯度OD260/OD280比值在1.6~1.8之间是正常的，较纯
大于1.8应该混有较多的RNA，小于1.6混有较多的蛋白质
抱歉我查资料的。
纯的蛋白质这个比值应该为0.57左右吧

不是纯的DNA应该是在1.8~2.0之间;而RNA在2.0~2.2之间吗?如果低的话是混了蛋白的缘故吧
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7楼2012-04-17 16:06:58
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dshlove

木虫 (正式写手)
★
wansanlian(金币+1): 谢谢参与
OD230是碳水化合物的吸收峰。
OD260是核酸之类的吸收峰。
OD280是蛋白多肽之类的吸收峰。
相互的比值反印的是你的蛋白或者核酸的纯度。至于理想比值，上面的都说的很清楚了。
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8楼2012-04-17 16:10:29
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可帅儿

银虫 (正式写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by wansanlian at 2012-04-17 16:06:58:
不是纯的DNA应该是在1.8~2.0之间;而RNA在2.0~2.2之间吗?如果低的话是混了蛋白的缘故吧

可能不同地方说的有点差异~但大致上是这样的，呵呵
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9楼2012-04-18 13:02:55
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