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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » KOD酶这样的温度设计合理吗？
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wininghe

金虫 (职业作家)

[交流] KOD酶这样的温度设计合理吗？ 已有4人参与

KOD       
95℃（3min）       
95℃（30s）
Cyc：35       
55℃（30s）
72℃（1min）
72℃（3min）       
4℃（10min）
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1楼 2012-04-14 08:51:35
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jimmy7633

木虫 (著名写手)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
amisking: 金币+1, 鼓励发帖交流。 2012-04-14 18:32:21
KOD延伸温度是68℃，但据说保真性不是很好。退火温度和延伸时间和你p的目的片段有关，一般情况1kb/min。
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3楼2012-04-14 17:15:57
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yuanbo934

至尊木虫 (著名写手)
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
amisking: 金币+2, 鼓励发帖交流。 2012-04-14 18:32:15
wininghe: 回帖置顶 2012-04-15 08:53:57
silicare: 金币+4, BioEPI+1 2012-04-18 08:14:06
好像KOD延伸温度是68℃。4℃可以没有，我认为应该：
94℃（3min）        
98℃（30s）
Cyc：30   （虽然是高保真，过多的循环会增加产物的错误几率）   
55℃（30s）
68℃（1min）
68℃（5min）        
4℃保温
祝好
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2楼2012-04-14 09:00:20
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wininghe

金虫 (职业作家)
引用回帖:
2楼: Originally posted by yuanbo934 at 2012-04-14 09:00:20:
好像KOD延伸温度是68℃。4℃可以没有，我认为应该：
94℃（3min）        
98℃（30s）
Cyc：30   （虽然是高保真，过多的循环会增加产物的错误几率）   
55℃（30s）
68℃（1min）
68℃（5min）        
...

谢谢啊。

产物的错误几率 指的是什么错误？
赞一下 回复此楼
4楼2012-04-15 08:28:37
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wininghe

金虫 (职业作家)
引用回帖:
2楼: Originally posted by yuanbo934 at 2012-04-14 09:00:20:
好像KOD延伸温度是68℃。4℃可以没有，我认为应该：
94℃（3min）        
98℃（30s）
Cyc：30   （虽然是高保真，过多的循环会增加产物的错误几率）   
55℃（30s）
68℃（1min）
68℃（5min）        
...

我这个位点是309bp，那么退火温度和延伸温度应该是多少？
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5楼2012-04-15 08:55:56
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