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wininghe

金虫 (职业作家)

[交流] KOD酶这样的温度设计合理吗? 已有4人参与

KOD       
95℃(3min)       
95℃(30s)
Cyc:35       
55℃(30s)
72℃(1min)
72℃(3min)       
4℃(10min)
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jimmy7633

木虫 (著名写手)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
amisking: 金币+1, 鼓励发帖交流。 2012-04-14 18:32:21
KOD延伸温度是68℃,但据说保真性不是很好。退火温度和延伸时间和你p的目的片段有关,一般情况1kb/min。
3楼2012-04-14 17:15:57
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yuanbo934

至尊木虫 (著名写手)

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
amisking: 金币+2, 鼓励发帖交流。 2012-04-14 18:32:15
wininghe: 回帖置顶 2012-04-15 08:53:57
silicare: 金币+4, BioEPI+1 2012-04-18 08:14:06
好像KOD延伸温度是68℃。4℃可以没有,我认为应该:
94℃(3min)        
98℃(30s)
Cyc:30   (虽然是高保真,过多的循环会增加产物的错误几率)   
55℃(30s)
68℃(1min)
68℃(5min)        
4℃保温
祝好
2楼2012-04-14 09:00:20
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wininghe

金虫 (职业作家)

引用回帖:
2楼: Originally posted by yuanbo934 at 2012-04-14 09:00:20:
好像KOD延伸温度是68℃。4℃可以没有,我认为应该:
94℃(3min)        
98℃(30s)
Cyc:30   (虽然是高保真,过多的循环会增加产物的错误几率)   
55℃(30s)
68℃(1min)
68℃(5min)        
...

谢谢啊。

产物的错误几率 指的是什么错误?
4楼2012-04-15 08:28:37
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wininghe

金虫 (职业作家)

引用回帖:
2楼: Originally posted by yuanbo934 at 2012-04-14 09:00:20:
好像KOD延伸温度是68℃。4℃可以没有,我认为应该:
94℃(3min)        
98℃(30s)
Cyc:30   (虽然是高保真,过多的循环会增加产物的错误几率)   
55℃(30s)
68℃(1min)
68℃(5min)        
...

我这个位点是309bp,那么退火温度和延伸温度应该是多少?
5楼2012-04-15 08:55:56
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