24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 1471  |  回复: 11
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

happywyh

铁虫 (小有名气)

[求助] PCR

PCR产物跑电泳,没有目的条带,有类似是引物二聚体的条带,什么原因造成的??
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

happywyh

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by imyting at 2012-04-11 00:02:36:
可能的原因太多了
1:引物量过多,退火温度较低,造成引物形成二聚体不能与模板结合;
2:退火温度太高,引物不能与模板集合;
3:PCR仪插孔老化,建议换些插孔试试;
4:Taq酶失活、体系不好、模板不对等等; ...

之前有一次用菌落PCR,疑似有目的条带和二聚体形成,之后再做就没有目的带
其他条件是不变的
5楼2012-04-11 10:39:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 12 个回答

孙启亮

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
很有可能是引物没设计好,建议重新设计引物,然后摸索条件
2楼2012-04-10 22:11:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

imyting

至尊木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
小丹木木: 金币+3, 太正确了,PCR不成功的因素是多方面的 2012-04-11 08:26:11
可能的原因太多了
1:引物量过多,退火温度较低,造成引物形成二聚体不能与模板结合;
2:退火温度太高,引物不能与模板集合;
3:PCR仪插孔老化,建议换些插孔试试;
4:Taq酶失活、体系不好、模板不对等等;
5:然后就是引物不好
    如果确定这些都不是原因,可再次重复……
悠哉游哉做实验,成兮败兮我随便
3楼2012-04-11 00:02:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wtyyyyy1988

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 跑内参是很有必要的,鼓励应助,常来哦 2012-04-11 08:27:13
第一,你是否确定你的cDNA没有问题,可以跑个内参看看 ;第二,如果模板没问题,你的目的条带含量是否很低?引物特异性是否很好?

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
我就是我
4楼2012-04-11 00:11:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 375求调剂 +3 雨夏整夜 2026-03-29 3/150 2026-03-29 10:37 by 唐沐儿
[考研] 329求调剂 +8 钮恩雪 2026-03-25 8/400 2026-03-29 10:24 by 唐沐儿
[考研] 315求调剂 +4 akie... 2026-03-28 5/250 2026-03-28 21:05 by zhq0425
[考研] 一志愿中南大学化学0703总分337求调剂 +5 niko- 2026-03-27 5/250 2026-03-28 14:25 by 唐沐儿
[材料工程] 一志愿C9材料与化工专业总分300求调剂 +8 曼111 2026-03-24 9/450 2026-03-28 07:58 by YYYYX1234
[考研] 张芳铭-中国农业大学-环境工程专硕-298 +4 手机用户 2026-03-26 4/200 2026-03-28 07:17 by mmm just
[考研] 0703化学求调剂,各位老师看看我!!! +5 祁祺祺 2026-03-25 5/250 2026-03-27 21:44 by 东方猪猪
[考研] 285求调剂 +4 AZMK 2026-03-27 7/350 2026-03-27 20:59 by AZMK
[考研] 266分求材料化工冶金矿业等专业的调剂 +4 哇呼哼呼哼 2026-03-26 4/200 2026-03-27 17:02 by zhyzzh
[考博] 26申博 +3 加油冲啊! 2026-03-26 3/150 2026-03-27 15:38 by cls512
[考研] 315调剂 +4 0860求调剂 2026-03-26 5/250 2026-03-27 11:23 by wangjy2002
[考研] 一志愿郑大085600,310分求调剂 +5 李潇可 2026-03-26 5/250 2026-03-27 11:14 by 不吃魚的貓
[考研] 352求调剂 +4 大米饭! 2026-03-22 4/200 2026-03-26 16:40 by 不吃魚的貓
[考研] 085602 289分求调剂 +8 WWW西西弗斯 2026-03-24 8/400 2026-03-26 16:33 by 不吃魚的貓
[考研] 281求调剂 +6 Koxui 2026-03-24 7/350 2026-03-26 15:37 by 无际的草原
[考研] 0854AI CV方向招收调剂 +4 章小鱼567 2026-03-23 4/200 2026-03-25 17:04 by CoderLoser
[考研] 284求调剂 +15 Zhao anqi 2026-03-22 15/750 2026-03-25 12:51 by wht0531
[考研] 一志愿吉林大学材料与化工303分求调剂 +4 为学666 2026-03-24 4/200 2026-03-25 11:27 by BruceLiu320
[考研] 调剂 +4 13853210211 2026-03-24 4/200 2026-03-24 19:44 by ms629
[考研] 333求调剂 +3 ALULU4408 2026-03-23 3/150 2026-03-23 19:04 by macy2011
信息提示
请填处理意见